人脐带间充质干细胞治疗对APPswe/PSEN1双转基因鼠脑内Aβ形成通路的影响

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目的:探讨人脐带间充质干细胞治疗对APPswe/PSEN1双转基因(AD)鼠脑内Aβ形成通路的影响。研究方法:用人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)注射12月龄APPswe/PSEN1双转基因鼠(实验组),同等剂量的PBS注射12月龄APPswe/PSEN1双转基因鼠(对照组),各组实验小鼠均在注射2、4、6次后,通过Morris水迷宫检测行为学变化;通过RT-PCR法测BACE1/APP mRNA水平;通过Western-blot法分别检测BACE1/APP/PS1/GFAP/NF-kB蛋白的水平;通过免疫组化法观察小鼠脑内Aβ及海马齿状回区Nestin/Dcx的分布。结果:分别注射2、4、6次后小鼠的平均潜伏期为:实验组<对照组(T=2.419,P<0.05;T=2.448,P<0.05;T=3.048,P<0.01);分别注射2、4、6次后小鼠BACE1mRNA的相对表达水平为:实验组<对照组(T=14.951,P<0.01;T=21.035,P<0.01;T=24.736,P<0.01);注射2、4、6次后小鼠APP mRNA的相对表达水平为:实验组<对照组(T=31.066,P<0.01;T=34.818,P<0.01;T=48.050,P<0.01);注射2、4、6次后小鼠BACE1的蛋白相对表达水平为:实验组<对照组(T=85.066,P<0.01;T=73.936,P<0.01;T=80.857,P<0.01);注射2、4、6次后小鼠APP的蛋白相对表达水平为:实验组<对照组(T=19.355,P<0.01;T=19.525,P<0.01;T=29.710,P<0.01);注射2、4、6次后小鼠PS1的蛋白相对表达水平均为:实验组<对照组(T=15.953,P<0.01;T=30.815,P<0.01;T=46.170,P<0.01);注射2、4、6次后小鼠NF-kB的蛋白相对表达水平均为:实验组<对照组(T=33.965,P<0.01;T=33.359,P<0.01;T=8.112,P<0.01);注射2、4、6次后小鼠GFAP的蛋白相对表达水平均为:实验组<对照组(T=62.612,P<0.01;T=70.268,P<0.01;T=43.374,P<0.01);Aβ在皮质和海马的面积百分比均为:实验组<对照组(皮质:T=10.059,P<0.001;T=16.859,P<0.001;T=7.778,P<0.001;海马:T=25.108,P<0.001;T=40.758,P<0.001;T=15.249,P<0.001);注射6次后实验组AD小鼠海马齿状回区Dcx/Nestin表达高于对照组。结论:人脐带间充质干细胞治疗可以改善AD小鼠的空间学习记忆能力。hUC-MSCs治疗影响了其BACE1/APP的转录和翻译过程,下调BACE1/PS1的活性及表达量,减少了脑内Aβ的沉积。hUC-MSCs治疗下调了GFAP和NF-kB的表达,进一步降低相关炎症反应。hUC-MSCs治疗促进了AD小鼠海马齿状回区的神经再生。
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