【摘 要】
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血管生成参与肿瘤、炎症和动脉粥样硬化等大多数疾病发生发展过程。激活素A是转化生长因子-β（transforming growth factor-β,TGF-β）超家族中的一员,被认为是一种调节体外内皮细胞生长和分化以及体内血管生成的因子。肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）是一种重要的炎症因子,由多种细胞产生,在细胞增殖、迁移、侵袭和血管生成中起着重要作用
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血管生成参与肿瘤、炎症和动脉粥样硬化等大多数疾病发生发展过程。激活素A是转化生长因子-β（transforming growth factor-β,TGF-β）超家族中的一员,被认为是一种调节体外内皮细胞生长和分化以及体内血管生成的因子。肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）是一种重要的炎症因子,由多种细胞产生,在细胞增殖、迁移、侵袭和血管生成中起着重要作用。课题组前期研究发现,激活素A与TNF-α主要通过相互拮抗作用影响成纤维细胞活性。因此,本研究选取人脐静脉内皮细胞（HUVEC）,探讨激活素A与TNF-α对HUVEC细胞活力、迁移、侵袭和管形成等生物学行为的影响,为进一步探索炎症、糖尿病、心血管疾病等血管生成相关疾病提供潜在治疗靶点。一、研究方法1.MTT法检测细胞活力。2.ELISA法检测细胞培养上清液IL-6水平。3.细胞划痕实验和Transwell小室实验检测细胞体外迁移和侵袭能力,基质胶管形成实验检测细胞管形成能力。4.RT-PCR和Western blotting检测细胞信号分子和细胞迁移相关分子基因和蛋白表达。二、研究结果1.激活素A与TNF-α均能够抑制HUVEC细胞活力。2.激活素A可诱导HUVEC细胞分泌IL-6,但能够降低TNF-α诱导的HUVEC细胞IL-6产生;PCR检测HUVEC细胞IL-6 m RNA水平与ELISA检测水平结果一致。3.激活素A能够抑制HUVEC细胞迁移、侵袭及管形成,并且能够抑制TNF-α诱导的HUVEC细胞迁移、侵袭及管形成的作用。4.激活素A对HUVEC细胞MMP-2、MMP-9及N-cadherin蛋白表达无明显作用,但激活素A能够抑制TNF-α诱导的HUVEC细胞MMP-2、MMP-9及N-cadherin蛋白表达升高。5.IL-6抑制剂LMT-28能够拮抗激活素A抑制HUVEC细胞迁移的作用,而对TNF-α诱导HUVEC细胞迁移无明显作用。6.激活素A和TNF-α均能增加HUVEC细胞p-Smad3及pSTAT3蛋白的表达;二者联合作用后,激活素A部分抑制TNF-α诱导HUVEC细胞p-Smad3及p-STAT3蛋白表达升高的作用。三、结论1.激活素A可通过经典的Smad通路调控HUVEC细胞活性。2.激活素A抑制TNF-α诱导的HUVEC细胞迁移,可能与IL-6/STAT3信号通路相关。3.激活素A抑制TNF-α诱导的HUVEC细胞管生成作用,提示激活素A可能参与血管生成的调节,有望成为管形成相关疾病的治疗靶点。
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