【摘 要】
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背景与目的卵巢癌（Ovarian Cancer,OC）是威胁女性健康的重要疾病之一。因早期无明显特异性症状和体征,卵巢癌患者多隐匿性起病,因此绝大多数患者确诊时已处于病程晚期,显著影响患者的生存和生活质量。手术联合化疗是目前临床上对于卵巢癌的主要治疗方法,且化疗发挥了重要且不可替代的作用。紫杉醇（Paclitaxel,PTX）是临床上卵巢癌患者最常用的化疗药物之一。然而PTX水溶性不佳,传统的PT
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背景与目的卵巢癌（Ovarian Cancer,OC）是威胁女性健康的重要疾病之一。因早期无明显特异性症状和体征,卵巢癌患者多隐匿性起病,因此绝大多数患者确诊时已处于病程晚期,显著影响患者的生存和生活质量。手术联合化疗是目前临床上对于卵巢癌的主要治疗方法,且化疗发挥了重要且不可替代的作用。紫杉醇（Paclitaxel,PTX）是临床上卵巢癌患者最常用的化疗药物之一。然而PTX水溶性不佳,传统的PTX溶剂为聚氧乙烯蓖麻油和无水乙醇,因其本身固有的理化性质,化疗过程中常伴随全身不良反应,且该溶剂还会影响紫杉醇的吸收、转运和利用,降低药物量-效关系,因此其安全性受到一定的限制。聚乳酸-羟基乙酸共聚物（Poly（lactic-co-glycolic acid）,PLGA）是一种新型高分子材料,因其可降解性和生物相容性好等特性而被广泛应用于再生医学领域。静电纺丝是一种利用聚合物溶液高效生产微纳米纤维的简单技术,生产效率高,成本低。由静电纺丝技术制备的纳米纤维膜具有高载药量、包封率好及可实现药物可控释放的优点。目前对于通过静电纺丝技术制备纳米纤维膜载药系统,来实现药物的控制释放,以达到更佳的抗肿瘤治疗效果研究甚少,本研究通过采用静电纺丝技术将PTX载入PLGA纳米纤维膜中,制备一种抗肿瘤药物缓释膜,与单纯游离的PTX疗效作比较,为卵巢癌治疗提供一种新的思路,为静电纺丝载药系统的临床开发运用奠定前期基础。方法1.采用静电纺丝技术制备PLGA纳米纤维膜,扫描电镜观察纳米纤维形貌及直径分布。2.采用CCK8细胞实验检测PLGA纳米纤维膜的生物相容性。3.静电纺丝技术制备PTX/PLGA纳米纤维膜,扫描电镜观察其形貌及直径分布。4.紫外法检测PTX/PLGA纳米纤维膜的载药量及体外药物释放率。5.采用CCK8法、活死细胞染色法、FITC-Phalloidin/Hoechst双染法和流式细胞术分别检测PTX、PTX/PLGA纳米纤维膜对卵巢癌细胞周期及凋亡的影响。结果1.通过静电纺丝技术制备的PLGA纳米纤维膜,其纳米纤维粗细均匀,具有良好的生物相容性。2.成功制备了PTX/PLGA纳米纤维膜,载药量为1.45%。随着PLGA的降解,PTX缓慢长期释放,从而成功构建抗肿瘤药物缓释膜。3.CCK8实验结果显示,与对照组相比,PTX组和PTX/PLGA组细胞存活率均明显下降,随着时间的延长,PTX/PLGA组大量释放PTX,PTX/PLGA组细胞存活率低于PTX组;活死细胞染色结果显示,与对照组相比,PTX和PTX/PLGA组红染的死细胞增多,绿染的活细胞减少。PTX/PLGA组绿染的活细胞数量与PTX组相比较少;FITC-Phalloidin/Hoechst双染结果显示,与对照组相比,PTX组、PTX/PLGA组细胞核碎裂,细胞缩成团状,细胞形态发生严重的破坏,并且PTX/PLGA组的细胞核数目更少,细胞形态变化更大,从而表明其对卵巢癌细胞的杀伤作用更强;流式细胞术结果显示,PTX组和PTX/PLGA组与对照组相比,G0/G1期明显减少,S期变化不明显,G2/M期细胞比例显著增多,可以使卵巢癌细胞发生早期和晚期凋亡,并且PTX/PLGA组诱导卵巢癌细胞凋亡的效果优于PTX组。结论1.通过静电纺丝法制备的PLGA纳米纤维膜粗细均匀,生物相容性良好。2.静电纺丝法制备PTX/PLGA纳米纤维膜,可伴随PLGA的降解,实现PTX的长期可控释放,初步证明具有抗肿瘤作用,伴随PTX的长期释放,效果优于单纯游离的PTX。
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