目的:通过APTES法或MPTMS法处理抗体芯片二氧化硅,使得载体表面羟基化或氨基硅烷化,在二氧化硅表面衍生出活泼的醛基基团;并与抗体的氨基发生还原胺化反应,从而将抗体固定在二氧化硅表面。并通过抗原、抗体反应定量检测固定在芯片上的抗体的生物活性,进而检测二氧化硅与蛋白结合时效。同时,亦验证了化合材料PI作为芯片载体与蛋白的相关结合效果。实验结果表明,PI也具有较强的结合蛋白能力,并与二氧化硅进行对比,从而筛选更适合抗体芯片的材料。　　 方法:以大肠杆菌BL21诱导表达抗原GST-CES2,GST-CES2单克隆细胞接种小鼠制备抗体,并以异硫氰酸荧光素(FITC)标记二抗,然后用双抗央心法仪将抗体点到醛基化玻片,通过抗体上的氨基与玻片表面的醛基反应实现样品的固定。将蛋白与经过修饰的二氧化硅片相结合,通过FITC发出的荧光获得分析信号,倒置荧光显微镜检测荧光作为结果指标之一。测得结合时效;使用改良的ELISA测定法,将制备好的抗原抗体与二氧化硅相结合,使用酶标仪检测OD值从而定量获得分析数值。　　 结果:成功制备了CES-2(GST标签)抗原,以及抗CES-2(GST标签)的单克降抗体。分别以SDS-PAGE测定相对浓度或纯度。结果显示,抗原浓度约为1.5mg/ml,单克降抗体的纯度达到85％以上。测定与FITC结合的二抗的荧光强度,IPP软件分析不同时间点的荧光强度,随着时间的变化,二氧化硅所呈现的荧光强度逐渐变弱,表明抗体蛋白可以与材料介质在一定时间内稳定的结合,并随时间的推移二氧化硅保持蛋白活性下降。经过一定时间后,荧光已经变得很微弱,表明抗体芯片表面结合的蛋白逐渐失去活性。酶标仪检测OD值,表明蛋白抗体可以与材料介质结合。　　 结沦:应用APTES法或MPTMS法的化学处理方法能够有效地处理材料表面,抗体固定在二氧化硅表面,并保持抗体生物活性。该固定方法在蛋白质检测、分析和蛋白质芯片中有广泛应用价值。二氧化硅作为载体可以制备抗体芯片。并且在一定时间范围内保持蛋白活性。