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MicroRNA (miRNA)是一类进化保守的内源性长约18～16核苷酸的单链非编码RNA，可与靶标基因信使RNA结合，在转录后水平抑制靶基因的表达，广泛参与生物体生长、发育和免疫等生物学过程。Toll样受体是一类单一跨膜非催化型受体，其胞外结构域能够识别病原相关分子模式，将胞外病原刺激信号传递致胞内，通过Toll信号通路激活细胞免疫反应。本究研通过高通量测序从凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）体内获得一种miRNA候选分子，同源性分析结果显示其与凡纳滨对虾miR-10和miR-10a高度同源，因此作为一种新miRNA暂命名为Lva-miR-10b。miRNA鉴定结果显示，miR-10b真实存在，且广泛分布于凡纳滨对虾各组织中，在病毒、革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌分别刺激后，其表达水平均表出不同程度的上调，表明其在细胞抗病毒和抗细菌免疫反应过程中充当重要调控作用。靶标鉴定结果显示，miR-10b能够靶向抑制Toll3的表达，而Toll3功能研究结果表明，其能分别促进Dorsal和Relish入核，进而激活受Dorsal和Relish调控的NF-κB效应基因的表达。此外，在凡纳滨对虾活体水平分别上调和下调miR-10b后，受Toll3调控的NF-κB效应基因分别表现出不同程度的下调和上调，进一步证明miR-10b能够靶向Toll3，进而抑制Dorsal和Relish入核激活NF-κB效应基因的表达。本研究鉴定出凡纳滨对虾一种新miRNA，并证明其能够靶向抑制Toll3，丰富了凡纳滨对虾miRNA转录谱，为对虾miRNA在免疫信号通路中的调控作用研究提供参考。Toll3的功能研究，进一步揭示了对虾Toll受体识别病原及传递免疫刺激信号的功能，有助于深入研究对虾NF-κB信号通路激活细胞抗病免疫的分子机制。