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目的:通过差相富集-荧光免疫染色原位杂交技术(Subtraction Enrichment-Immunofluorescence in situ hybridization,SE-iFISH)检测复发胶质瘤患者外周血液中循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC),初步探索复发胶质瘤与CTC关联。方法:通过在2018年7月-2019年1月期间,入组的20例复发胶质瘤患者及10例健康志愿者。收集20例复发胶质瘤患者信息、病理类型。将外周血液标本通过差相富集的方法对血液标本中可能为循环肿瘤细胞的细胞进行富集,通过8号染色体探针对所富集的细胞进行处理,并使用DAPI染色,同时使用CD45、CD133单克隆抗体进行免疫标记,将8号染色体倍数异常同时DAPI~+、CD45~-的细胞作为CTC。采用SPSS 23进行统计学分析,符合正态分布的计量资料使用t检验,不符合正态分布的计量资料采用Mann-Whitney U秩和检验、不同亚组间使用Kruskal-Wallis H检验比较统计学差异,以P<0.05为差异有统计学意义。结果:本研究在2018年7月至2019年1月间,纳入20例复发胶质瘤患者及10例健康志愿者。在20例复发胶质瘤的患者血液样品中有95%(19/20)的患者检测出了CTC。其中CTC的检出数量范围为2-111个/6mL血(中位数7.5个/6mL血)。检出的CTC总数为378个,其中三倍体87个(87/378,23.02%),来源于18例患者(18/20,90%)。四倍体55个(55/378,14.55%),来源于15例患者(15/20,75%)。超五倍体236个(236/378,62.43%),来源于19例患者(19/20,95%)。其中6例患者(6/20,30%)中的18个CTC被检出了CD133~+(18/378,4.76%),其余被发现的360个CTC均为CD133~-表达(360/378,95.24%)。在WHOⅡ级肿瘤患者血液标本中发现的CTC为62个(62/378,16.40%),其中CD133~+CTC为1个(1/378,0.26%)。在WHOⅢ级肿瘤患者血液标本中发现的CTC为68个(68/378,17.99%),其中CD133~+CTC为9个(9/378,2.38%)在WHOⅣ级肿瘤患者血液标本中发现的CTC为248个(248/378,65.61%),其中CD133~+CTC为8个(8/378,2.12%);在不同级别复发胶质瘤患者中CTC数量无显著性差异(P=0.558),在不同级别复发患者中CD133~+CTC数量无显著性差异(P=0.418),在不同级别复发胶质瘤患者中三倍体(P=0.207)、四倍体(P=0.550)、超五倍体(P=0.179)数量无显著性差异,在WHOⅣ级肿瘤患者中2例检出CD133~+CTC患者出现了原位外复发,应当注意他们之间可能存在联系。在健康志愿者组中,仅在1例中发现1个8号染色体单倍体细胞,数量明显小于复发胶质瘤患者(P<0.05)。结论:通过本研究,结果表明在复发胶质瘤患者外周血液当中存在CTC,通过SE-iFISH技术可以对复发胶质瘤患者外周血液循环中CTC进行较高敏感性的检测;尚未发现不同级别、不同病理类型复发胶质瘤与CTC数目之间的关系,高级别复发胶质瘤与低级别复发胶质瘤相比,四倍体、超五倍体CTC数目有升高的现象,但需要进一步证明;CTC数量较多同时存在CD133~+CTC的患者可能与原位外复发有关,由于本研究样本较小,仍需进一步更大样本量的研究。