头霉素C发酵工艺的研究

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本文对头霉素C的原始产生菌株链霉菌OFR1022进行自然选育和紫外诱变后,筛选得到了一株遗传稳定性较好的高产菌株,将该菌株用于头霉素C的发酵,使头霉素C的产量达到了原来的1.74倍。通过对高产菌株的斜面孢子培养基及培养条件进行优化后,得到了孢子更丰富、颜色更深、成熟周期缩短的孢子斜面。随后,利用响应面法中的Box-Behken中心组合实验对产头霉素C发酵培养基中的迟效碳、氮源配比进行优化后,在玉米淀粉58.73g/L棉籽粉19.65g/L、普通鱼粉12.49g/L的条件下,其发酵效价较优化前提高了40.0%。同时发现在发酵培养基中添加生长因子、硫源和前体可以明显提高头霉素C的产量。在发酵培养基中添加0.6g/L的生物素B7可以提高产量约14.7%;添加亚硫酸钠、硫酸钾和硫酸钠等硫源对头霉素C的生物合成有促进作用,其中添加0.6g/L的硫酸钠可使产量提高约9.1%;在发酵培养基中添加前体氨基酸可促进头霉素C的生物合成,利用响应面法中的中心旋转组合实验对L-赖氨酸、L-缬氨酸、L-半胱氨酸和DL-甲硫氨酸的添加量进行优化后,在添加量为L-半胱氨酸0.15g/L、DL-E甲硫氨酸0.25g/L、L-缬氨酸0.2g/L、L-赖氨酸0.3g/L的条件下,头霉素C的产量提高了27.2%。最后,对头霉素C的发酵培养条件进行优化后发现,接种后28℃培养48h再转至25℃培养至发酵结束,可使产量提高约7.1%。最终通过一系列的优化试验,头霉素C的发酵单位由原来的900.8μg/mL提高到了3005.7μg/mL。
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