咖啡碱和绿原酸对小鼠和3T3-L1细胞脂肪代谢的影响

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目的:研究咖啡主要成分咖啡碱,绿原酸及其组合对小鼠和3T3-L1细胞的脂类代谢的影响。方法:40只雌性昆明小鼠被随机分成4个小组:对照组,0.06%咖啡碱组,0.2%绿原酸组,0.06%咖啡碱+0.2%绿原酸组,每周测重,喂养12周。摘取并称各器官、腹腔内脂肪(IPAT)。分析血清生化指标,测定肝脏脂类含量、脂肪酸代谢酶活性、mRNA和蛋白的表达量。MTT法检测咖啡碱、绿原酸对3T3-L1细胞增殖的影响;3T3-L1细胞诱导分化12天测定细胞内TG含量;用Real Time qPCR分析诱导分化细胞中PPARγ2、C/EBPα、AMPK、ATGL、Glut4、ACO、CAT、HSL和GPDH的mRNA表达水平;用Western Blotting测定AMPK、ATGL、HSL和FAS的蛋白表达水平;测定FAS、HSL和GPDH的酶活性。结果:(1)咖啡碱+绿原酸显著减少小鼠的体重增加和IPAT质量,而单独组没有明显变化。(2)咖啡碱+绿原酸降低血中和肝脏中脂类的浓度。(3)咖啡碱+绿原酸明显增加ACO、CAT的酶活性和mRNA表达水平,显著抑制FAS的酶活性和蛋白表达水平。(4)咖啡碱+绿原酸能够显著地降低TG的合成,主要是绿原酸的作用。(5)咖啡碱+绿原酸,在细胞分化第4天降低PPARγ2、C/EBPα mRNA的表达水平。(6)咖啡碱+绿原酸,在细胞分化第12天,提高AMPK、ATGL、HSL的活性、mRNA和蛋白的表达水平;增强了Glut4、ACO、CAT mRNA的表达水平;抑制了GPDH活性和mRNA表达水平。结论:咖啡碱+绿原酸通过降低血中生化指标和肝脏中脂类的浓度,减少小鼠的体重和IPAT质量,有较好降脂减肥作用。其作用机制是通过调节肝脏及脂肪细胞与脂类代谢相关酶的活性、基因和蛋白表达水平,抑制脂肪细胞分化核转录因子的mRNA表达水平,减少脂肪沉积。提示咖啡碱+绿原酸具有潜在预防肥胖的功能。
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