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目的:探讨uPA合成抑制剂Amiloride(阿米洛利)对人宫颈癌细胞体外侵袭迁移及凋亡的影响及可能的机制。方法:通过体外培养人宫颈癌细胞Hela,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Amiloride对Hela细胞中Matriptase、uPA、uPAR、MMP-2 mRNA表达的影响;采用细胞迁移划痕修复实验测定Amiloride对Hela细胞迁移能力的影响;采用millicell小室人工重组基底膜侵袭实验检测Amiloride对Hela细胞侵袭能力的影响;采用流式细胞分析技术检测Amiloride对Hela细胞凋亡的影响。结果:1.半定量RT-PCR结果显示人宫颈癌Hela细胞系高表达Matriptase、uPA、uPAR、MMP-2 mRNA。2.半定量RT-PCR结果显示加入不同浓度的Amiloride作用24小时后,50μmol/L Amiloride即可明显下调Hela细胞uPA、MMP-2 mRNA的表达(P﹤0.05),并具有明显的浓度依赖性;不同浓度Amiloride对Matriptase、uPAR mRNA表达无明显影响(P>0.05);加入150μmol/L Amiloride,作用不同时间后,与对照组相比,2小时后Hela细胞中uPA mRNA产量即明显下降(P<0.01),而4小时后MMP-2 mRNA产量始下降(P<0.05),并具有明显的时间依赖性。3.细胞迁移划痕修复实验检测50、100、150μmol/L Amiloride作用后,Hela细胞的6、12、24h迁移距离均明显小于对照组(F=56.893,360.000,360.038,均P<0.01),细胞迁移能力与细胞中uPA mRNA表达水平呈正相关(r=0.942,P<0.01)。4.Matrigel Millicell小室检测50、100、150μmol/L Amiloride作用24小时后,穿透人工基质膜的Hela细胞数较无Amiloride作用的对照组明显减少,并呈浓度依赖性(F=226.95,P<0.01),细胞侵袭力与细胞中uPA mRNA表达水平呈正相关(r=0.969,P<0.01)。5.流式细胞分析技术检测50、100、150μmol/L Amiloride作用24、48小时后, Hela细胞的24、48早期凋亡率均明显高于对照组(F=59.895,472.428,均P<0.01),细胞早期凋亡率与细胞中uPA mRNA表达水平呈负相关(r=﹣0.941,P<0.01)。结论:1.低浓度的uPA合成抑制剂阿米洛利即可特异性抑制人宫颈癌Hela细胞系uPA mRNA表达,并进一步导致uPA系统下游因子MMP-2 mRNA表达的下降,并具有浓度-时间依赖性;而不同浓度阿米洛利对uPA受体(uPAR)及uPA系统上游调节因子Matriptase无明显抑制作用。2.uPA可能是与宫颈癌侵袭转移相关的基因,阿米洛利可通过下调uPA mRNA表达抑制人宫颈癌Hela细胞的体外侵袭转移能力。3.uPA可能是与细胞凋亡相关的基因,阿米洛利可通过下调uPA mRNA表达诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡的发生,提示值得进一步研究其抗肿瘤作用。