背景： 登革病毒(DEN)为黄病毒属的单股正链RNA病毒，包括4个血清型。DEN感染一般引起登革热(DF)，严重时引起登革出血热(DHF)和登革休克综合症(DSS)。自从1978年广东省佛山地区和广州地区重现DF以来，每隔几年广州地区都有不同程度的DF流行。DF的流行(尤其是DHF/DSS)严重危害了本地区人们的健康和经济的发展。目前，对DHF/DSS的发病机理不清楚(尤其是T细胞免疫反应在其中所起的作用)严重阻碍了DEN疫苗的研发。感染DEN或接受候选DEN疫苗后，机体内产生了DEN血清型特异性T细胞和血清型间交叉反应性T细胞。研究表明，DEN血清型特异性T细胞免疫反应可以保护机体免受同型病毒的再次感染，而DEN血清型间交叉反应性T细胞免疫反应不但能清除病毒、抑制其复制而且参与了DHF/DSS的发病。T细胞表位是激发T细胞免疫的必备因素，因此鉴定并研究DEN特异性T细胞表位对于探讨DHF/DSS的发病机理、研发基于登革T细胞表位的多肽疫苗都具有重要的作用。 目的： 筛选DEN特异性T细胞表位并进行免疫学特性的研究；分析各表位的潜在应用价值，为DHF/DSS发病机理的阐明和登革T细胞表位多肽疫苗的研制奠定基础。 方法： 应用RT-PCR、5′RACE(Rapid amplication of cDNA ends)和3′RACE技术对2002年从广州分离的一株DEN-1(71/GZ02株)进行全序列测定；应用Mega 4.0系统进化分析软件对71/GZ02株同历年广东省内分离的DEN-1株及世界上其他地方分离的DEN-1株的进化关系进行分析，从而为本课题中T细胞表位预测选择地方代表株；基于71/GZ02株，GZ/80株及DEN-1、2、3、4的一些参考株，利用Rankpep在线软件预测DEN特异性T细胞表位；选择在DEN-1或多种DEN血清型分离株中保守并且预测的其限制性的HLA-Ⅰ或Ⅱ类分子的等位基因型在中国南方人群中占较高比率的T细胞表位作为候选表位，并以此合成多肽；分离DF(DEN-1感染引起)恢复者的PBMCs(Peripheralblood mononuclear cells．外周血单个核细胞)，用合成的多肽刺激PBMCs，利用ELISPOT(Enzeyme-linked immunospot assay，酶联免疫斑点试验)、ICS-FC(Intracellular cytokinestaining and flow cytometry，细胞内细胞因子染色/流式细胞术)和ELISA(Enzyme-linkedimmunosorbent assay，酶联免疫吸附试验)技术检测IFN-γ分泌细胞数目及细胞培养上清中IFN-γ的产生量，从而确定DEN特异性T细胞表位；对DF恢复者进行HLA分型，进而确定DEN特异性T细胞表位其限制性的HLA等位基因型。 结论： 1、71/GZ02株对广州地区DEN-1分离株具有较好的代表性； 2、首次在国内利用生物信息学技术结合体外免疫学试验确定了9条DEN特异性T细胞表位。这9条T细胞表位包括在单一DEN血清型中保守的表位和在多种DEN血清中保守的表位，提示这些T细胞表位对于探讨DHF/DSS发病机理和研发基于T细胞表位的多肽疫苗中都具有非常重要的价值； 3、由于这些T细胞表位其限制性的HLA等位基因型在中国南方人群中占有较高的比率，因此，这些表位具有广泛的人群覆盖性和潜在的广阔的应用前景。