随着世界能源领域的逐渐匮乏，环境污染的日趋严重，新能源的开发与深度利用成为当今世界能源领域的研究焦点。2008年之后，由于生物能源乙醇的亲水性及运输困难性，生物能源领域的聚焦点开始向高级醇类倾斜。酿酒酵母（Saccharomyces cerevisia）作为一种可以通过自身物质代谢产生醇类、尤其是可以产生高级醇的真核模式生物，具备本身细胞构成与高等动植物相似，生长周期短、易于培养等特点。由于酿酒酵母的这些特点，它在理论研究和实际工业生产领域都得到了很大的关注。随着合成生物学的不断深入，真核生物领域的探索使得酿酒酵母的研究不再仅仅局限于传统的饮料、食品等方面，而是更多的深入到分子水平的研究。现阶段关于酿酒酵母的分子水平研究主要集中在酿酒酵母基因组最小化底盘的构建和获得高效生产人类所需产品的工程菌两大方面。因其在真核生物领域探索中的关键点和突破口作用，本文采用的菌株为S288C株系衍生体BY系列菌株作为出发菌。　　本文对S288C株系衍生体BY系列菌株的基因组进行大片段基因删减，运用Latour方法，采取URA3作为正负筛标记，成功删除IV染色体右臂中一段23kb大片段，共计10个基因，片段长度约占IV染色体的1.5％，达到无痕删除基因组连续大片段基因删减的效果。经检测删除菌株可以与出发菌株具有相同的生长状况，由此可进一步推知该大片段长基因为酿酒酵母非必须基因片段。此实验为染色体上其他非必须大片段基因的删除提供了理论和技术支持，同时也由于删除部分中包含醇代谢相关基因，为后续醇耐受性检测提供原材料。　　本文还通过高浓度高级醇耐受的方法，对已经成功敲除与酿酒酵母生长、发酵、代谢等相关基因的菌株以及通过化学诱变所得的菌株进行新型乙醇替代物2-甲基-1-丁醇的耐受性检测。在实验过程中成功得到高耐受基因敲除所得菌株1株，高耐受化学诱变所得菌株2株，并对所得菌株生长情况进行研究分析，包括其生长曲线、性状遗传等方面。为后续得到高耐受性菌株提供了原材料，并为后续醇高产、耐受菌株的研究和获得提供前期基础。