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目的本实验采用多种现代研究技术，探讨“双固一通”针法对糖尿病大鼠的治疗作用和对胰岛素抵抗的影响，并比较“双固一通”常规电针法与“双固一通”强刺激电针法效应的差异，为针灸临床研究探索新方法，并为进一步的深入研究提供实验依据。方法1．“双固一通”针法简介：来源于导师王华教授的“双固一通”针灸治疗学思想。针灸防治疾病注重治病求本，以正气为本，固护先天和后天是其基础和关键；通过“治”来达到“防”的目的，“治”是积极的、主动的“防”。双固，即固护人体先天之本和后天之本，选用具有固护先天和固护后天的腧穴为主穴，固定使用；“一通”即疏通经脉，通泻病邪，用穴为阿是穴或随证取穴。本课题所采用的“双固一通”针法，即选取固护先天之本的关元和固护后天之本的足三里为主穴，配用治疗糖尿病的经验穴胰俞进行针刺。2．实验方法：200±20gWistar雄性大鼠60只，随机选取10只为正常对照组(A组)，另50只行链脲佐菌素腹腔注射造模，造模成功的37只大鼠随机分为模型组(B组，12只，实验过程中因血糖过高死亡1只)，“双固一通”常规电针组(C组，13只)，“双固一通”强刺激电针组(D组，12只，实验过程中因血糖过高死亡3只)。正常对照组、模型组不予治疗；“双固一通”常规电针组、“双固一通”强刺激电针组根据导师王华教授创立的“双固一通”针法，取穴关元、足三里为“双固”用穴，胰俞为“一通”用穴。关元穴不行电刺激，足三里、胰俞采用上海产G6805-2型电针治疗仪行穴位电刺激(同侧足三里、胰俞接一对电极)，连续波，频率100Hz，“双固一通”常规电针组强度1mA，留针15分钟；“双固一通”强刺激电针组强度6mA，留针30秒。首次检测血糖后第二天开始针刺治疗，共两个疗程，每个疗程6天，疗程间隔2天。造模72小时、疗程结束分别剪尾采血测空腹血糖，疗程结束后摘眼球采血取血清，用放射免疫法检测血清胰岛素，大鼠处死后，取胰腺，用免疫组化SABC法检测大鼠胰腺胰岛素受体β亚单位(insulin receptorβ，InsRβ)、磷脂酰肌醇3-激酶p110亚单位(Phosphatidylinositol 3-kinase p110，PI-3Kp110)表达，运用图象分析系统进行胰腺InsRβ、PI-3Kp110免疫阳性物检测。结果1．C组和D组均明显降低糖尿病大鼠的血糖水平(P＜0.05)，使降低的胰岛素水平有升高的趋势(P＜0.05)，使糖尿病大鼠胰岛素敏感性指数升高(P＜0.05)；C组和D组使糖尿病大鼠的饮水、进食量有不同程度的减少(P＜0.05)，体重较模型组增加(P＜0.05)，两组疗效间无统计学差异(P＞0.05)。2．糖尿病大鼠胰腺InsRβ免疫阳性物平均吸光度值较正常大鼠明显减少(P＜0.05)，C组和D组均使糖尿病大鼠胰腺InsRβ表达显著增多(P＜0.05)，两组间疗效无统计学差异(P＞0.05)。3．糖尿病大鼠胰腺PI-3Kp110免疫阳性物平均吸光度值较正常大鼠明显减少(P＜0.05)，C组和D组均使糖尿病大鼠胰腺PI-3Kp110表达显著增多(P＜0.05)，两组间疗效无统计学差异(P＞0.05)。结论1．“双固一通”针法能显著改善糖尿病大鼠多饮、多食和体重减轻等症状；降糖作用确切，使胰岛素水平上升，改善了糖尿病大鼠的胰岛素抵抗状态。2．“双固一通”针法能显著增加糖尿病大鼠胰腺减少的InsRβ、PI-3Kp110表达，这可能是其影响胰岛素信号转导通路从而改善糖尿病胰岛素抵抗的重要环节。3．“双固一通”常规电针法与强刺激电针法疗效无显著性差异，而强刺激电针法可以大大减少每次治疗的时间，可以为今后的针灸治疗提供新的思路。4．本课题为阐释“TX固一通”针法改善糖尿病大鼠胰岛素抵抗的作用机制提供了科学的实验依据，体现了其固护正气为本的思想的优势。