【摘 要】
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目的:观察联合去甲基化药物与去乙酰化酶抑制剂对抑癌基因PTPN6表达的影响,通过对白血病细胞株的观察间接了解两药联合是否能增强抗白血病作用。方法:1.应用甲基化PCR(Methyl
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目的:观察联合去甲基化药物与去乙酰化酶抑制剂对抑癌基因PTPN6表达的影响,通过对白血病细胞株的观察间接了解两药联合是否能增强抗白血病作用。方法:1.应用甲基化PCR(Methylation-Specific PCR,MSP)检测THP-1细胞株PTPN6基因的甲基化状态。2.以不同浓度的去甲基化药物(阿扎胞苷)与组蛋白去乙酰化酶抑制剂(西达本胺和帕比司他)单独或联合应用于细胞株,应用qt-PCR方法检测PTPN6m RNA表达的变化,应用Western Blot技术检测PTPN6蛋白水平的变化。结果:1.THP-1细胞株DNA中PTPN6基因存在甲基化。2.阿扎胞苷可剂量-时间依赖性影响THP-1细胞株PTPN6m RNA的表达(P<0.05),而西达本胺及帕比司他对THP-1细胞PTPN6m RNA的影响存在时间依赖性(P<0.05)。3.当阿扎胞苷达到一定的浓度后,去甲基化药物联合去乙酰化酶抑制剂可明显增加PTPN6表达,并优于二者单独应用,且联用效果大于两药单用效应总和(P<0.05)。结论:1.当达到一定浓度时,去甲基化药物能够增加THP-1细胞中抑癌基因PTPN6的表达水平,抑制肿瘤细胞株的增殖。2.联合应用去甲基化药物和去乙酰化酶抑制剂能明显增加白血病细胞株THP-1细胞中抑癌基因PTPN6表达,其作用优于单药应用,且联用效应超过二者单用效应的总和。
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