【摘 要】
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目的:探究miR-184靶向FOXO1对鹦鹉热衣原体（Chlamydia psittaci,Cps）感染的宿主细胞产生氧化应激的影响以及Wnt/β-catenin信号通路在其中的调控作用,为进一步揭示Cps的致病机制提供实验依据。方法:用感染复数（multiplicity of infection,MOI）为3的Cps感染人支气管上皮细胞（Human Bronchial Epithelial Ce
【基金项目】
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miR-184靶向AURKA调控鹦鹉热衣原体诱导的宿主细胞氧化应激损伤,2020年度湖南省教育厅科学研究项目立项重点项目（20A438）； 鹦鹉热衣原体CPSIT0846蛋白经MAPKs信号通路调控线粒体途径介导的宿主细胞凋亡,2020年度湖南省自然科学基金项目（2020JJ4527）；
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目的:探究miR-184靶向FOXO1对鹦鹉热衣原体（Chlamydia psittaci,Cps）感染的宿主细胞产生氧化应激的影响以及Wnt/β-catenin信号通路在其中的调控作用,为进一步揭示Cps的致病机制提供实验依据。方法:用感染复数（multiplicity of infection,MOI）为3的Cps感染人支气管上皮细胞（Human Bronchial Epithelial Cells,HBE）44 h,分别检测细胞内miR-184、FOXO1、ROS、MDA、SOD及GSH的水平,评价Cps感染对HBE细胞氧化应激以及miR-184和FOXO1表达水平的影响。体外转染miR-184 inhibitor、miR-184 mimic或共转染FOXO1 siRNA和miR-184 inhibitor,检测Cps感染后miR-184、FOXO1水平,评价miR-184与FOXO1的相关性;检测ROS、MDA、SOD和GSH水平,评价miR-184或FOXO1对Cps感染诱导的氧化应激的影响;检测Wnt3a、β-catenin、C-myc、Cyclin D1水平,评价miR-184或FOXO1对Cps感染诱导Wnt/β-catenin信号通路的活化情况。转染miR-184 mimic或FOXO1 siRNA后,用ICG-001处理HBE细胞以抑制Wnt/β-catenin信号通路,检测Cps感染后Wnt3a、β-catenin、C-myc、Cyclin D1、ROS、MDA、SOD和GSH水平变化,评价Wnt/β-catenin信号通路对Cps感染HBE细胞氧化应激的影响。结果:经MOI为3的Cps感染HBE细胞44 h后,miR-184表达上调,FOXO1表达下调,ROS、MDA增高,SOD、GSH降低。转染miR-184 inhibitor后,Cps感染的HBE细胞内miR-184、Wnt3a、β-catenin、C-myc、Cyclin D1表达下调,而FOXO1表达上调,ROS水平、MDA含量降低,SOD活力、GSH含量增高;而转染miR-184mimic后,变化趋势相反。共转染FOXO1 siRNA和miR-184 inhibitor的Cps感染HBE细胞内,与仅转染miR-184 inhibitor的Cps感染组相比,Wnt3a、β-catenin、C-myc、Cyclin D1表达上调,而FOXO1表达下调,ROS水平、MDA含量增高,SOD活力、GSH含量降低。ICG-001处理的Cps感染HBE细胞内,Wnt3a、β-catenin、C-myc、Cyclin D1表达下调,ROS水平、MDA含量降低,SOD活力、GSH含量增高。结论:1.Cps感染诱导HBE细胞产生氧化应激;2.Cps感染使HBE细胞内miR-184表达上调,FOXO1表达下调;3.miR-184靶向FOXO1可通过激活Wnt/β-catenin信号通路调控Cps诱导的HBE细胞氧化应激。
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