【摘 要】
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La蛋白作为一种RNA结合蛋白广泛存在于各种真核生物,其作用主要是结合于新合成RNA的3’端并参与加工与代谢。La蛋白可以结合的RNA包括RNA聚合酶Ⅲ转录的所有新合成转录子和一
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La蛋白作为一种RNA结合蛋白广泛存在于各种真核生物,其作用主要是结合于新合成RNA的3’端并参与加工与代谢。La蛋白可以结合的RNA包括RNA聚合酶Ⅲ转录的所有新合成转录子和一些其他RNA聚合酶合成的小RNA。拟南芥中真正的La基因已经被证实是AtLa1,在胚胎生长发育过程中起重要作用。其表达水平敲低后导致茎尖分生组织无法维持,而AtLa1的缺失导致atla1突变体胚胎发育终止。然而粮食作物水稻中的La基因尚未有研究报道。水稻中存在两个La蛋白的同源基因,即LOCOs02g39700(Os39)和LOC_Os04g42010(Os42)。本研究通过qRT-PCR及启动子驱动的GUS组织染色分析发现Os39和Os42在水稻组织中基本成组成型表达,与Genevestigator数据库预测的数据相符;亚细胞定位结果显示这两个基因都定位于细胞核中,并且通过对开放阅读框的截短实验发现蛋白核定位信号存在于碳末端30个氨基酸中;Os42的过表达植株与野生型相比没有明显变化,而其CRISPR/Cas9敲除植株表现出植株矮化、叶片向远轴端卷曲等表型,与AtLa1的转基因抑制株系的植株矮小、卷曲畸形针叶表型有一致性;Os39过表达及CRISPR/Cas9的转基因植株与野生型相比均没有明显变化。由此,我们可初步推断Os42是水稻中真正的La基因,并在水稻的叶片极性建成中发挥重要作用,以上实验为进一步研究工作的开展奠定了基础。
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