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双酚A(BPA)是一种环境类激素,具有一定的生物毒性,影响生态环境并威胁人类的安全健康。双酚A可以导致婴幼儿早熟、孕妇流产、前列腺癌等,影响人体的内分泌系统,破坏DNA,也被认为是一种内分泌干扰物。然而双酚A又是一种重要并应用广泛的有机化工原料,在生产和使用过程中,双酚A会迁移到环境中,威胁人类健康。为了保障生态系统的安全和人类的健康,控制双酚A在环境中的残留,并建立双酚A的快速检测方法,显得尤为重要。本论文根据双酚A的特定结构,选择类似物双酚酸BVA作为半抗原,偶联牛血清白蛋白BSA,制备完全人工免疫抗原BVA-BSA,免疫Balb/c小鼠,制备免疫脾细胞,与体外培养的骨髓瘤SP2/0细胞融合,并经过间接ELISA检测筛选和有限稀释法亚克隆,得到阳性杂交瘤细胞株,并注射到不完全佐剂致敏的Balb/c小鼠腹腔,制备小鼠腹水,即单克隆抗体。单抗经过辛酸-硫酸铵法纯化,SDS-PAGE以及间接竞争ELISA方法鉴定,得到高特异性高灵敏度的双酚A单克隆抗体,并用于分析检测环境样品中双酚A残留量。荧光示踪物是由荧光素与半抗原偶联得到。本实验选择三种荧光素(1ysFITC、EDF、AMF)进行制备荧光标记物,其中lysFITC和EDF是由FITC衍生而来,三种荧光素与活化的双酚酸的羧基结合,得到荧光素标记物,并经过TLC分离纯化和FPIA鉴定,最终筛选出BVA-AMF为该实验的最佳荧光示踪物,并用于建立荧光偏振免疫分析方法。基于双酚A单克隆抗体和荧光示踪物成功制备的基础上,建立荧光偏振免疫分析法FPIA,用于检测样品中的双酚A含量,检测限为5.6ng/mL, IC50为140.6ng/mL,线性范围为11.32-904.21ng/mL,相关系数R2=0.9913。并结合仪器方法HPLC和酶免方法ELISA对FPIA方法进行验证,三种方法同时对环境水样品做添加回收试验,FPIA的回收率为87.91-114.28%,HPLC法为85.40-104.18%,ELISA法为92.60-112.70%,FPIA法与HPLC法的相似度为0.9971,FPIA法与ELISA法的相似度为0.9964。由此可知,荧光偏振免疫分析方法的实验结果准确可靠,适用于分析检测样品中双酚A的残留量。