【摘 要】
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为进一步揭示蓖麻毒素的毒理作用机制,本研究从蓖麻毒素的基本生物学特征(等电点、分子量、氨基酸序列、细胞毒性)分析入手,对其毒性作用的发挥及相关作用机理进行深入探讨。
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为进一步揭示蓖麻毒素的毒理作用机制,本研究从蓖麻毒素的基本生物学特征(等电点、分子量、氨基酸序列、细胞毒性)分析入手,对其毒性作用的发挥及相关作用机理进行深入探讨。以小鼠为研究对象,在口服蓖麻毒素72h以后,病变反应最为明显,采用HE染色病理切片、透射电镜、扫描电镜观察等技术对蓖麻毒素的肠道及免疫器官损伤作用进行详尽分析;鉴于镜下观察的细胞凋亡状况,本研究从凋亡的基本特征入手(线粒体膜电位、形态学特征、DNA“ladder”等),对蓖麻毒素可诱导免疫细胞凋亡的机制进行研究。首先检测凋亡细胞胞内活性氧(ROS)水平,继而分析了与ROS有密切级联反应的丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)三条通路的激活反应,胞外调节激酶(ERK1/2)、应激激活蛋白激酶(P38)、c-jun氨基末端激酶(JNK1/2 ),并进一步做阻断分析。结果显示,蓖麻毒素诱导淋巴细胞的凋亡是通过激活P38/MAPK来实现的。鉴于蓖麻毒素对小鼠肠道的强损伤作用,本研究利用蛋白质组学研究手段(2-DE、SPR、HPLC、HPCE-ESI-MS)在体外对小肠刷状缘膜蛋白(BBMP)与蓖麻毒素之间的作用以及互作强度做具体分析,筛选到28种与蓖麻毒素具有互作效应的蛋白。
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