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目的：本实验拟研究细胞因子TGF-β1和bFGF在PRK术后角膜伤口愈合过程中的表达变化，探讨两种细胞因子在PRK术后角膜愈合过程中及角膜雾状混浊(Haze)形成过程中的作用；对照观察酒精去上皮法和机械去上皮法PRK术后角膜伤口愈合过程，探讨酒精对角膜基质愈合的影响。 方法：将24只健康大耳白兔(48只眼)按左右眼分为两组，每只兔一眼行酒精去上皮法PRK，另一眼行机械去上皮法PRK，分别于术后1天、1周、1月、3月随机处死6只兔(每组6只眼)；设立正常对照组3只兔(6只眼)。裂隙灯显微镜下观察角膜Haze及角膜上皮愈合、水肿消退的情况；光镜下观察角膜组织病理学变化并计数不同时间点角膜基质浅层角膜细胞数量的变化；用逆转录-PCR法及免疫组化法检测正常对照组及PRK手术组术后1天、1周、1月、3月不同时点角膜TGF—β1和bFGF的表达情况。 结果： 1．酒精去上皮法及机械去上皮法PRK术后1周，可见1～2级haze形成，机械去上皮组haze程度较酒精去上皮组轻(P＜0.01)；术后1个月haze形成最明显，可达2～3级，未见4级，酒精去上皮组与机械去上皮组相比差异无统计学意义(P＞0.05)。；术后3个月，haze明显减轻，酒精去上皮组与机械去上皮组相比差异无统计学意义(P＞0.05)。 2．免疫组织化学检查发现：酒精去上皮法及机械去上皮法PRK术后不同时间角膜细胞均有TGF-β1、bFGF表达。术后1个月时，基质内角膜细胞胞浆TGF-β1、bFGF表达明显增加。 3．逆转录—PCR检查发现：术后1天时，酒精去上皮组和机械去上皮组兔角膜的TGFβ1和bFGFRT-PCR产物电泳条带光密度值下降；术后1周时，两组TGF-β1、bFGFRT-PCR产物电泳条带光密度值较正常对照组升高 天津医科大学硕士学位论文 (P<0 .01)，且酒精去上皮组高于机械去上皮组(P<0 .01);术后1个月，两 组TGF一pl、bFGFRT-PCR产物电泳条带光密度值最强(P<0.01)，但酒精 去上皮组与机械去上皮组相比差异无显著意义(P>.05);术后3个月，TGF- pl、bFGFRI’- PCR产物电泳条带光密度值明显下降，与正常对照组相比差 异无显著性，酒精去上皮组与机械去上皮组相比差异无显著意义(P>0.05)。4.酒精去上皮法及机械去上皮法PRK术后1天，角膜浅层基质均出现“无 细胞带”，浅层基质内角膜细胞数量减少，且酒精去上皮组较机械去上皮组 明显(P<0.01);术后1周基质内角膜细胞活化增生，浅层基质内角膜细胞 数量明显增加，且酒精去上皮组较机械去上皮组明显(P<0 .01);术后1个 月浅层基质内角膜细胞数量达高峰，但酒精去上皮组与机械去上皮组相比 差异无显著意义(P>0 .05);3个月时下降，但仍多于正常对照组，酒精去上 皮组与机械去上皮组相比差异无显著意义(P>0 .05)。5.酒精去上皮法与机械去上皮法PRK术后TGF一pl、bFGFmRNA的表达变 化与其术后角膜浅层基质内活化增生的角膜细胞均存在正相关关系，相关 系数分别为:酒精去上皮组术后浅层基质内角膜细胞数量与TGF一pl的相 关系数。0.744、与bFGF产0.738;机械去上皮组术后浅层基质内角膜细胞 数量与TGF一p 1 r=0.664、与bFGF厂 0.785。结论:1.酒精去上皮法及机械去上皮法PRK术后均出现角膜上皮下混浊(haze)，术 后1个月时达高峰，之后逐渐下降。术中低浓度、短时间酒精的应用，虽然 由于酒精的化学毒性作用，术后1周时酒精去上皮组haze程度较机械去上 皮组重，但术后1个月、3个月时，两者差别没有显著意义。2.PRK术后基质内角膜细胞经历“减少一活化一增生”的过程。活化增生的角 膜细胞转化为成纤维母细胞，分泌细胞外基质(EcM)，影响胶原纤维排列 及角膜透明性，酒精去上皮法及机械去上皮法PRK术后haze形成最明显时 角膜基质内活化增生的角膜细胞最多。天津医科大学硕士学位论文3.PRK术后TGF一pl、bFGFmRNA呈动态表达变化，变化规律与haze形成有关， 与术后基质内角膜细胞的活化、增生成正相关关系，术后1个月时TGF一旦1 及bFGFInl浏A表达达高峰，此时两组术后角膜haze也最明显，它们通过刺 激角膜基质细胞增生、分化，促进角膜基质内ECM的形成，影响haZe的 形成。