本文从以下几方面进行论述：　　第一部分 胚胎培养液中cfDNA与胚胎质量之间的关系研究　　目的：通过对胚胎培养液中游离DNA（cfDNA）的分离纯化和定量，揭示胚胎培养液中cfDNA的一般特征，明确培养液中cfDNA特征与胚胎质量之间的关系，并对胚胎培养液中cfDNA的来源进行初步分析。　　方法：收集ICSI患者的单个胚胎培养液，经真空泵提取纯化出cfDNA，行ALU-qPCR，检测cfDNA的含量，分析cfDNA片段的完整性。检测胚胎培养液在收集后1h、5h、25h、49h的储存时段下cfDNA的稳定性。收集与培养液对应的胚胎发育信息，分析胚胎培养液中cfDNA的可能来源以及其与胚胎发育潜能之间的关系。　　结果：4℃储存条件下，胚胎培养液样本在1h、5h、25h、49h的储存时段下cfDNA的含量和完整性经过ANOVA统计分析显示，差异无统计学意义（P＞0.05）。结果表明在4℃的保存条件下，胚胎培养液中cfDNA比较稳定，但仍有下降的趋势。　　优质胚胎培养液中cfDNA的含量低于非优质胚胎培养液（P＜0.01），而两组中cfDNA的完整性没有差异（P＞0.05）；优质胚胎中碎片程度在5%≤碎片率＜15%的胚胎其培养液中cfDNA的含量低于15%≤碎片率≤25%的胚胎其培养液（P＜0.05），而两组中cfDNA的完整性没有差异（P＞0.05）；正常受精胚胎培养液中cfDNA的含量低于异常受精胚胎培养液（P＜0.05），而cfDNA的完整性高于异常受精胚胎培养液（P＜0.01）；未妊娠组胚胎培养液中cfDNA的含量高于移植妊娠组（P＜0.05）而两组中cfDNA的完整性没有差异（P＞0.05）；未卵裂组胚胎培养液中cfDNA的含量与完整性低于卵裂组（P＜0.05）。　　0PN未卵裂组胚胎培养液、2-cell阻滞组胚胎培养液、4-cell阻滞组胚胎培养液和正常8-cell组胚胎培养液中cfDNA的含量与完整性之间存在差异（P＜0.05），其中以4-cell阻滞时期含量最高，以正常8-cell时期含量最低，以0PN未卵裂时期完整性最低。　　结论：卵裂期胚胎培养液中cfDNA比较稳定，其产生可能与细胞分裂有关。胚胎培养液中cfDNA含量与胚胎细胞的碎片程度密切相关；正常受精的优质胚胎cfDNA释放量较少，因此胚胎培养液中的cfDNA含量与胚胎的发育潜能相关。　　第二部分 利用胚胎培养液进行Y染色体AZF微缺失的无创检测　　目的：本研究拟通过检测ICSI胚胎培养液中Y染色体微缺失的发生，明确培养液中cfDNA用于Y染色体微缺失无创检测的可能性。　　方法：收集ICSI治疗的150枚废弃胚胎及对应的培养液，用多重置换扩增（MDA）方法对胚胎及对应的培养液进行全基因组扩增（WGA），扩增成功的胚胎及对应的培养液行Y染色体检测（采用DYZ/DXZ引物），然后利用Y染色体微缺失检测试剂盒，对Y染色体AZF区域上共16个STS位点进行多重PCR检测，比较来自胚胎DNA和对应培养液cfDNA的AZF检测结果，明确利用胚胎培养液进行Y染色体检测及Y染色体上AZF微缺失检测的可行性和准确性。　　结果：WGA结果显示，150个废弃胚胎扩增成功146例（97.3%）；对应的培养液样本扩增成功144例（96%）。Y染色体检测结果显示，144个胚胎中70个胚胎存在Y染色体，74个胚胎不存在Y染色体。胚胎与对应培养液检测结果均一致。AZF微缺失检测结果显示，来源于AZF微缺失的4例患者产生的21枚含有Y染色体的胚胎均显示不同程度的缺失：其中15枚胚胎与亲代缺失类型相同，均表现为AZFc段微缺失。剩下6枚胚胎缺失程度增大，其中4枚为AZFb+c段缺失，两枚为AZFc+d段缺失。来源于无AZF微缺失的72例患者产生的49枚含有Y染色体的胚胎有9枚出现de novo缺失，de novo缺失率达18.4%(9/49)，均表现为AZFc段微缺失。胚胎及对应培养液检测结果均一致。　　结论：可以利用胚胎培养液进行Y染色体AZF微缺失的无创检测。AZF区域的微缺失可通过单精子卵胞浆注射从父代传递到子代，并在这个过程中可出现de novo微缺失或缺失程度增大。