论文部分内容阅读
在养禽业中常见到一些生长发育严重受阻的鸡,俗称“小老鸡”或“僵鸡”,这种鸡全称为鸡生长受阻和发育障碍综合症(runting and stunting syndrome,RSS)。RSS鸡在规模化养鸡场和个体养殖户中均有发现。这类鸡主要表现为久养不大、只吃不长、体重体格上均比正常鸡小,羽毛生长较慢,还伴随有腹泻现象。这些鸡不仅消耗饲料,生长性能差,而且易患病,是一个潜在的传染源。由于RSS鸡的成因不明,在养殖中无法对症防治,往往只能采用现场观察及时淘汰、丢弃的措施来处理,一定程度上影响养殖效益。本研究在分析RSS鸡表型表现的基础上,用Solexa测序检测肝脏组织中mRNA与microRNA表达,研究生长受阻鸡的成因。RSS鸡解剖观察可见消化器官损伤,如肠道、肝脏和腺胃等均有症状表现,也存在一定比例没有明显病变的RSS鸡。选取52日龄新兴矮脚黄商品代肉鸡的正常个体与没有明显病变、没有ALV和REV感染的RSS个体为实验材料筛选其肝脏组织中差异表达的microRNA和mRNA,结果显示:RSS鸡与正常鸡比较,上调的microRNA有15个,下调的microRNA有7个,3个microRNA只在RSS鸡肝脏组织中表达;上调的基因有604个,下调的基因有555个。有6个基因只在RSS鸡肝脏组织中表达,分别是LOC415662、Clorf78、ZZEF1、CEBPA、LOC418836和FOXP2;有5个基因只在对照鸡肝脏组织中表达,分别是CINP、MYH3、EEF1A2、MAP3K13和IMMP1L。分析认为这些差异表达基因可能与RSS出现的影响因素有关,主要表现在氧化磷酸化、丙酮酸代谢、脂肪酸代谢以及胆汁酸生物合成等生物学通路上显著富集,涉及多个信号通路。利用DF-1鸡胚成纤维细胞系,在细胞水平上验证gga-miR-221、gga-miR-30b和gga-miR-30c的生物学功能,发现gga-miR-221影响MAP3K7IP2基因的表达水平,而gga-miR-30b和gga-miR-30c对CARS基因的表达情况有一定的影响。通过对差异表达基因MAP3K71P2及CARS部分序列进行变异筛查,发现这两个基因序列均有较丰富的多态性。
本文从表型、DNA、RNA三个水平上剖析RSS鸡形成的影响因素。