亮氨酸对妊娠后期胎猪蛋白质沉积的影响及机理研究

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母猪妊娠后期胎儿宫内发育受限是新生仔猪发病率和死亡率偏高的重要原因之一。保证胎猪蛋白质沉积是决定胎猪宫内发育的关键因素。如何促进妊娠后期营养物质在胎猪体内的沉积进而提高新生仔猪初生重是提高母猪繁殖效率的关键科学问题。研究表明,亮氨酸在调节机体蛋白质合成和促进动物生长方面起着重要作用。本试验旨在探讨母猪妊娠后期日粮添加不同浓度梯度亮氨酸对胎猪蛋白质沉积的影响及其机理。试验选取200头妊娠第70 d的健康“长×大”母猪,按照遗传背景、胎次、体况和繁殖成绩等均衡分配的原则随机分为4个处理组,每个处理组50个重复,每个重复1头母猪。妊娠后期,试验母猪分别饲喂以下4种日粮:(1)对照组(CON):玉米-豆粕型基础母猪日粮;(2)0.40%LEU组:基础母猪日粮+0.40%亮氨酸;(3)0.80%LEU组:基础母猪日粮+0.80%亮氨酸;(4)1.20%LEU组:基础母猪日粮+1.20%亮氨酸。哺乳期各组母猪均饲喂同种常规日粮。母猪分娩前,采集母猪血液;分娩时,采集胎盘和脐带血;分娩后,统计母猪繁殖性能;采集初乳和常乳测定乳成分;进行新生仔猪屠宰试验,采集血液、十二指肠、空肠、回肠和背最长肌等样品,检测胎盘、新生仔猪小肠和背最长肌氨基酸转运载体(LAT1、SNAT1、SNAT2、4F2hc和rBAT)以及背最长肌mTOR信号通路相关蛋白的表达量。结果如下:(1)繁殖性能:与CON组相比,母猪妊娠后期日粮添加0.80%的亮氨酸显著提高新生仔猪初生个体重(P<0.05);妊娠后期日粮添加0.80%的亮氨酸可极显著缩短母猪断奶-发情间隔(P<0.01);此外,妊娠后期日粮添加0.40%的亮氨酸对断奶成活率和断奶窝重有提高的趋势(P<0.10)。然而,与CON组相比,妊娠后期日粮添加0.40%、0.80%和1.20%的亮氨酸对窝产仔数、窝产活仔数、死胎+木乃伊胎数、健仔数、弱仔数、断奶头数和初生窝重均无显著影响(P>0.10)。(2)乳成分:母猪妊娠后期日粮中添加0.40%的亮氨酸可显著提高常乳第7 d乳脂含量(P<0.05),且有提高常乳第14 d乳脂含量的趋势(P<0.10)。(3)器官指数:与CON组相比,母猪妊娠后期日粮添加0.40%的亮氨酸显著增加了新生仔猪小肠的相对重量(P<0.05)。(4)氨基酸组成:与CON组相比,母猪妊娠后期日粮添加0.40%、0.80%和1.20%的亮氨酸极显著提高分娩前母猪血浆中亮氨酸的浓度(P<0.01)。与CON组和0.40%LEU组相比,0.80%LEU组和1.20%LEU组的缬氨酸和异亮氨酸极显著降低(P<0.01)。与0.80%LEU组相比,1.20%LEU组的缬氨酸和异亮氨酸极显著降低(P<0.01)。与CON组相比,妊娠后期日粮添加0.40%、0.80%和1.20%的亮氨酸极显著提高新生仔猪血浆中亮氨酸的浓度(P<0.01),显著降低新生仔猪血浆中缬氨酸和异亮氨酸的浓度(P<0.05)。与0.40%LEU组相比,妊娠后期日粮添加0.80%和1.20%的亮氨酸显著降低新生仔猪血浆中缬氨酸的浓度(P<0.05)。与0.40%和0.80%LEU组相比,妊娠后期日粮添加1.20%的亮氨酸显著降低新生仔猪血浆中异亮氨酸的浓度(P<0.05)。与0.80%LEU组相比,妊娠后期日粮添加1.20%的亮氨酸极显著降低新生仔猪血浆中亮氨酸的浓度(P<0.01)。(5)激素:与CON组相比,妊娠后期日粮添加0.40%、0.80%和1.20%的亮氨酸对分娩前母猪血浆、脐带血浆和新生仔猪血浆中胰岛素、瘦素、生长激素、胰高血糖素和IGF-I的浓度无显著影响(P>0.10)。(6)氨基酸转运载体:母猪妊娠后期日粮添加0.40%的亮氨酸显著提高胎盘,新生仔猪十二指肠、空肠、回肠和背最长肌中LAT1、SNAT1、SNAT2、4F2hc和rBAT的表达量(P<0.05);添加0.80%的亮氨酸显著提高胎盘SNAT1和SNAT2,新生仔猪十二指肠、空肠和背最长肌LAT1、SNAT1、SNAT2、4F2hc和rBAT,回肠4F2hc和rBAT的表达量(P<0.05);添加1.20%的亮氨酸显著提高胎盘rBAT和SNAT1,新生仔猪回肠rBAT,十二指肠、空肠和回肠4F2hc和rBAT以及背最长肌中LAT1、SNAT1、SNAT2、4F2hc和rBAT的表达量(P<0.05),显著降低十二指肠LAT1,空肠和回肠LAT1、SNAT1和SNAT2的表达量(P<0.05)。(7)mTOR信号通路:母猪妊娠后期日粮添加0.40%、0.80%和1.20%的亮氨酸显著提高新生仔猪背最长肌p-mTOR、p-4E-BP1和p-S6K1的表达量(P<0.05);添加0.40%和0.80%的亮氨酸显著提高新生仔猪背最长肌p-S6的表达量(P<0.05)。结论:在本试验条件下,母猪妊娠后期日粮添加0.40~0.80%的亮氨酸可提高新生仔猪初生个体重以及哺乳仔猪的生长性能,改善母猪乳成分,增强母猪胎盘和新生仔猪小肠氨基酸转运载体的表达,促进母体-胎儿的营养物质转运,并通过提高背最长肌mTOR信号通路相关蛋白的表达水平,促进胎猪宫内发育,提高蛋白质在胎猪体内的沉积。
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