PYCR1在结肠癌中的表达及生物学功能的研究

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:davidfeng2009
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目的 探索敲减PYCR1(pyrroline-5-carpoxylate reductase-1,吡咯啉-5-羧酸还原酶-1)的表达对于结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响。方法 oncomine数据库预测,RT-qPCR和免疫组化检测PYCR1在结肠癌组织和癌旁组织的表达情况,并筛选PCYR1高表达结肠癌细胞株。用脂质体转染质粒shPYCR1和对照质粒shPYCR1-vector,RT-qPCR和Western blot检测干扰情况。CCK-8,Transwell和克隆形成实验检测敲低PYCR1后结肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移情况。Western blot检测E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、β-catenin和c-Myc的蛋白表达情况。结果 PYCR1在结肠癌组织中呈现高表达,选取HCT116和SW480细胞进行后续实验。RT-qPCR和Western显示shPYCR1组mRNA(P<0.05)和蛋白表达(P<0.01)明显低于shPYCR1-vector组。与shPYCR1-vector组相比,CCK8、克隆形成和Transwell实验结果表明转染shPYCR1质粒后干扰PYCR1表达可明显抑制细胞增殖、迁移和侵袭能力。(P<0.05)Western blot结果显示相对于shPYCR1-vector组,shPYCR1组的E-cadherin表达上升(P<0.05),N-cadherin、Vimentin、β-catenin和c-Myc表达下降(P<0.05)。结论 PYCR1在结肠癌组织中呈现高表达水平,干扰PYCR1可明显抑制结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭能力。
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