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目的:本课题通过采用从小到大不同浓度ATRA诱导培养小鼠NCSs,研究在此条件下细胞发生自噬、分化和凋亡过程当中FIP200蛋白和它的相互作用蛋白的表达水平改变,来初步证实维甲酸是通过影响FIP200的蛋白表达水平来对神经干细胞不同生物过程进行调控的,同时研究自噬分别与分化和凋亡的关系,从而为进一步揭示维甲酸对神经系统疾病的影响提供依据。方法:从孕14.5天C57BL/6J小鼠胎鼠中分离得到大脑组织进行提取细胞为NSCs,通过光学显微镜下观察及分化后的免疫荧光染色鉴定。第三代神经干细胞分别加入不同浓度大小的ATRA(0、0.1、0.5、1、5、10、15、20μM)诱导培养24h,吖啶橙(AO染色)计数自噬发生率,为检测LC3-Ⅱ,用RT-PCR法和蛋白质印迹法检测FIP200和p53基因蛋白的表达水平,研究维甲酸对神经干细胞FIP200和自噬水平变化的作用。加入较低浓度的ATRA(0、0.1、0.5、1、5μM)诱导7天,运用细胞免疫荧光法及蛋白质印迹法检测各组分化率,加入自噬抑制剂LY294002后,检测1μM ATRA诱导NSCs的分化率变化,研究ATRA诱导NSCs分化与自噬的关系;以及蛋白质印迹法检测RB1表达水平。加入较高浓度的ATRA(5、10、15、20、40μM)诱导培养24h,运用流式细胞术检测神经干细胞的凋亡率,再次运用RT-PCR法和蛋白质印迹法技术检测此5组FIP200蛋白的表达水平,加入自噬抑制剂后比较凋亡率的变化,研究ATRA诱导NSCs凋亡与自噬的关系。结果:(1)胎鼠大脑组织中可以提取出NSCs,镜下观察呈圆球状生长,细胞分化荧光鉴定结果得以再次证实。(2)不同浓度维甲酸诱导神经干细胞,FIP200蛋白和自噬水平是先增高后下降的趋势,P53则相反。(3)低浓度的维甲酸诱导神经干细胞分化与FIP200表达成正相关,抑制自噬不能抑制分化,分化与RB1有关。(4)高浓度的维甲酸诱导神经干细胞凋亡与FIP200表达成负相关,抑制自噬可以在一定程度上增加凋亡。结论:FIP200在维甲酸诱导神经干细胞过程中起到的是促分化、抗凋亡的作用。