斑蝥酸钠注射液对裸鼠人胃癌移植瘤组织淋巴管生长因子影响的实验研究

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实验目的:观察斑蝥酸钠注射液对裸鼠人胃癌NUGC-4移植瘤生长及淋巴结转移的影响,通过研究斑蝥酸钠注射液对移植瘤组织中血管内皮生长因子C (Vascular endothelial growth factor-C, VEGF-C)及血管内皮生长因子受体3(Vascular endothelial growth factor receptor-3, VEGFR-3)表达的影响,探讨斑蝥酸钠在防治胃癌淋巴转移方面的作用机制。实验方法:利用红色荧光蛋白转染的人胃癌NUGC-4细胞,通过外科原位移植的方法建立裸鼠胃癌模型。将32只裸鼠随机分为斑蝥酸钠高剂量组、斑蝥酸钠低剂量组、5-Fu组和生理盐水组。术后9天开始给予不同干预,分别为斑蝥酸钠高剂量、斑蝥酸钠低剂量、5-Fu、生理盐水,观察各组移植瘤生长及淋巴结转移情况,到达实验终点时,处死所有实验裸鼠,并在开放荧光系统下观察肿瘤生长及转移情况,切除移植瘤并测瘤重,计算抑瘤率和淋巴结转移率。行免疫组化,半定量比较、分析各组肿瘤组织中VEGF-C、VEGFR-3蛋白的表达,并计数肿瘤微淋巴管密度(Lymphatic microvessel density, LMVD)实验结果:1.移植瘤在各组裸鼠中均生长良好,部分裸鼠伴有淋巴转移。斑螫酸钠高剂量组、低剂量组、5-Fu组和生理盐水组的淋巴结转移率分别为:37.5%、75%、50%和87.5%。2.斑蝥酸钠高剂量组、5-Fu组的平均瘤重均小于生理盐水组(P<0.05),两组间差异无统计学意义(P>0.05)。斑蝥酸钠低剂量组的平均瘤重与生理盐水组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3.斑蝥酸钠高剂量组、斑蝥酸钠低剂量组与5-Fu组均可降低肿瘤组织中的LMVD,下调肿瘤组织中VEGF-C、VEGFR-3蛋白的表达,与生理盐水组比较,差异均有统计学意义(P<.05):斑蝥酸钠高剂量组与5-Fu组比较,无统计学差异(P>0.05);斑蝥酸钠高剂量组肿瘤组织中VEGF-C、VEGFR-3蛋白表达明显低于斑蝥酸钠低剂量组,两组之间差异有统计学意义(P<0.05)。实验结论:1.高剂量组斑蝥酸钠可明显抑制裸鼠人胃癌移植瘤的生长及淋巴结转移。2.斑蝥酸钠可通过下调VEGF-C及VEGFR-3蛋白的表达,降低肿瘤组织中淋巴管的生成,可能是其抑制胃癌淋巴转移的作用机制。
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