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目的探讨人类ADRB2基因rs1042713位点多态性与0-5岁儿童喘息的相关性,初步了解该位点在本地区0-5岁儿童的分布特征、位点多态性与临床表型的关系,寻求可能的个体化干预措施。方法1.按入选标准在广东省妇幼保健院门诊及住院部收集了115份病例纳入研究,按时间顺序对病例进行编号,初始治疗均使用吸入性糖皮质激素(ICS),或者联合沙丁胺醇气雾剂(SABA)。同时留取口腔上皮细胞用于DNA位点检测。后续治疗按病情发展进行阶梯治疗调整。对全部的研究对象建立临床资料调查表,记录研究对象既往史、现病史、治疗过程及随访的情况。同时从到院进行健康体检儿童中选取118名作为对照组。并进行相关基因位点检测。2. DNA标本采集与检测:采样拭子(遗传检测采样盒)采集口腔上皮细胞样本用于SNP检测。采用硅胶吸附法(专利号: 200610023818.0)从样本细胞中抽提基因组DNA,TaqMan探针实时荧光定量PCR法检测SNP位点,由荧光定量PCR仪读取检测结果。3.统计学处理:SPSS17.0软件统计各分组数据。两样本均数采用F检验方差,t检验比较差异;遗传Hardy-Weinberg平衡定律检验、病例组与对照组基因型及等位基因的比较、病例组各基因型间不同表型与位点多态性的比较采用卡方(X2)检验;危险度采用比值比(OR)检验与描述。检验水平取a=0.05,P<0.05差异有统计学意义。结果1. ADRB2基因第46位多态性表现在:A→G,致肽链Arg16→Gly,从而引起蛋白质功能的改变。检测结果:病例组等位基因A频率=0.587,G=0.413,基因型频率:AA=35.7%,AG=46.1%,GG=18.3%;对照组A=0.547,G=0.453,AA=29.7%,AG=50.0%,GG=20.3%。经卡方检验,P值均>0.05,两组基因型分布均符合Hardy-weinberg平衡定律,具有较好的均衡性。2.病例组与对照组等位基因之间、基因型之间的分布比较经卡方检验,P值均>0.05,差异无统计学意义,提示位点多态性与0-5岁儿童喘息易感性不相关。3.喘息发作严重程度分为轻、中、重、危重四级别,经卡方检验,P<0.05,各级别在基因型的分布差异有统计学意义,相比AA与GG基因型,GG纯合子病人在喘息急性发作中更容易出现严重病例。4.初始治疗满6个月时,记录过去两周是否增加SABA的使用次数。经卡方检验,P值<0.05“增加使用次数”在各基因型的分布差异有统计学意义。结果提示与AA和AG基因型相比,GG组需要更多的SABA使用。5.夜间症状(非感染性咳嗽或喘息)在各基因型的分布经卡方检验,P值>0.05,各组差异无统计学意义。位点多态性与夜间症状无相关性。6.嗜酸性粒细胞比例(是否增高4%以上)在各基因型分布情况,P值>0.05,差异无统计学意义。7.考察患儿既往、治疗期间及随访期间的活动诱发喘息的情况,卡方检验各基因型间的分布差异,P值<0.05,结果提示AA纯合子病例比AG及GG型具有更低的活动诱发喘息的可能性。结论1.本项研究对照组等位基因频率A=0.547,G=0.453,与中国其它地区人群、日本、美国黑人的基因分布情况相近,与欧美地区白人相差较远。2.在本研究,ADRB2基因rs1042713位点多态性与0-5岁儿童喘息性疾病的临床表型相关,与不同种族、地区之间的研究结果不全一致。3.在本组研究,rs1042713位点多态性与0-5岁儿童喘息性疾病的病情发作严重程度、beta-2受体激动剂治疗的反应性、活动诱发性喘息相关。4. rs1042713位点多态性与0-5岁儿童喘息性疾病的易感性、夜间喘息、嗜酸性粒细胞的变化不相关。