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本论文包括两部分:（一）CHD1基因在急性髓细胞白血病中的表达特点及意义;（二）CHD1-RUNX1融合基因的致病机制研究。第一部分CHD1基因在急性髓细胞白血病中的表达特点及意义目的:检测本中心初诊急性髓细胞白血病（AML）患者CHD1基因的表达水平,探讨CHD1基因的表达情况与初诊AML患者的FAB分型、染色体核型、基因突变等实验室检查及预后的相关性。方法:1.收集188例初诊AML患者骨髓标本、30例非恶性血液病患者骨髓标本,采用实时定量PCR方法检测其CHD1基因的表达水平,并进行GAPDH内参基因表达的测定,CHD1基因相对表达量=2-（CT 0f gene-CT of internal control）,通过cutoff finder网站确定0.038作为临界值,因此规定低于0.0038为CHD1基因低表达,高于0.0038为CHD1基因高表达。2.应用相关统计学方法分析CHD1基因的表达与FAB分型、染色体核型、基因突变等的相关性。对164例non-M3 AML患者进行随访,分析初诊non-M3 AML患者CHD1基因的表达水平与OS及EFS的关系,探讨CHD1基因表达水平的高低与疾病危险度及预后的相关性。结果:1.不同CHD1基因的表达水平在188例初诊AML患者中均检测到,其中CHD1基因低表达者占134/188（71.3%）。在FAB分型（M1到M6）中,均出现CHD1基因的低表达,其中在M2亚型中所占比例最高（28.4%）,其次为M1（23.1%）,M4（17.2%）,M5（12.7%）,M3（11.2%）,M6（7.5%）。M1到M6各亚型间差异未见统计学意义（P>0.05）。2.188例初诊AML患者CHD1基因的表达水平相比于30例非恶性血液病患者（包括缺铁性贫血及原发免疫性血小板减少症）显著降低,差异具有显著统计学意义（P<0.0001）。在188例初诊AML患者中,CHD1基因低表达组与高表达组相比,具有较小的中位发病年龄（median,39 vs.44,P=0.047）及较低的血红蛋白计数（77 vs.99.5g/L,P=0.001）。而两组在性别、白细胞及血小板计数、乳酸脱氢酶水平及初诊骨髓原始细胞百分比方面相比,两组未见明显差异（P>0.05）。在149例患者中进行基因突变分析发现,CHD1低表达组中,CEBPA等位基因双突变的发生率较低（16.7%vs.31.7%,P=0.043）。在预后危险分层中,CHD1低表达组的患者预后中等及预后较差组所占比例显著增高（109/119,91.6%）。在164例non-M3 AML患者染色体核型分型中,CHD1低表达组复杂核型异常所占比例较高表达组显著增高,差异有统计学意义（P=0.029）。3.在164例non-M3 AML患者中进行完全缓解率及复发率比较,可以看出,在CR率的比较中,CHD1低表达组显著低于CHD1高表达组（57.1%vs.75.6%,P=0.030）。而相对于复发率,CHD1低表达组复发率有增高趋势,但未出现统计学差异（14.7%vs.23.5%,P=0.299）。164例non-M3 AML患者生存分析显示,OS及EFS在CHD1低表达组显著偏低（P=0.024,P=0.032）。在单用化疗的68例患者中根据cutoff值分为CHD1低表达及高表达两亚组,其中,CHD1低表达组中OS及EFS显著偏低,达统计学差异（P=0.047,P=0.040）。另外,在90例正常核型亚组分析中,EFS在CHD1低表达组同样也是显著降低的（P=0.023）,但两组OS差异无统计学意义（P=0.069）。多因素分析显示,CHD1基因的低表达水平对OS具有独立预后意义（HR=4.579;95%CI,2.169-9.664,P=0.000）。结论:CHD1基因作为抑癌基因,与非恶性血液病患者相比,初诊AML患者CHD1基因的表达水平显著降低。该基因的表达水平与实验室特征、疾病危险分层及患者预后等临床特征相关。CHD1基因的表达水平可作为初诊AML患者的预后分层指标之一。第二部分CHD1-RUNX1融合基因的致病机制研究目的:探讨重组腺病毒介导的CHD1-RUNX1融合基因对小鼠NIH3T3成纤维细胞增殖和凋亡能力的影响。方法:1.将携带CHD1-RUNX1融合基因的重组质粒载体p HBAd-MCMV-REP转染小鼠NIH3T3细胞系,构建稳定表达CHD1-RUNX1蛋白的细胞株,同时设立空载体转染组及空细胞对照组。2.确定重组腺病毒Ad-CHD1-RUNX1在NIH3T3细胞中的感染效率,最佳感染时间和MOI值,并采用RT-PCR方法检测转染后CHD1-RUNX1在NIH3T3细胞中的表达情况。3.通过CCK8实验观察转染后NIH3T3细胞的增殖能力,以及流式细胞术（Annexin V/7-AAD）检测转染后NIH3T3细胞的凋亡情况。结果:1.重组腺病毒Ad-CHD1-RUNX1转染NIH3T3细胞MOI值为150,转染时间在48h时,倒置荧光显微镜观察NIH3T3细胞的感染效率最高,约为70%。通过实时定量RT-PCR方法检测到转染后NIH3T3细胞CHD1-RUNX1的表达。该融合基因的成功转染为下一步研究该重组腺病毒对NIH3T3细胞的生物学效应奠定了基础。2.实验组NIH3T3细胞体外增殖能力与空载体对照组相比显著增强（P<0.05）。并随转染时间的延长,实验组NIH3T3细胞的增殖能力逐渐增强。在转染24h后,细胞生长速度明显加快,到48h达高峰。流式细胞检测细胞凋亡实验可发现,CHD1-RUNX1融合基因可抑制小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3的凋亡。结论:此细胞功能学实验证实了重组腺病毒Ad-CHD1-RUNX1转染NIH3T3细胞后可促进其体外增殖能力,并可以抑制其凋亡。这一实验结果初步阐明了CHD1-RUNX1融合基因的生物学行为,为后续进一步研究该融合基因对白血病细胞生物学特性的影响,以及致白血病机制提供了实验基础。