【摘 要】
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目的:本研究探讨锌指蛋白A20在慢性鼻窦炎伴鼻息肉（chronic rhinosinusitis with nasal polyps,CRSw NP）及正常鼻粘膜组织中的表达,并比较A20在各亚型慢性鼻窦炎中的表达差异,探讨可能干预CRSw NP的分子机制,为其治疗策略提供新的思路。方法:选取30例2021.01～2021.10期间于南华大学附属第一医院耳鼻咽喉科行鼻内镜下鼻息肉切除的患者,术前采
【基金项目】
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湖南省临床医疗技术创新引导项目（课题编号:2020SK51803）；
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目的:本研究探讨锌指蛋白A20在慢性鼻窦炎伴鼻息肉（chronic rhinosinusitis with nasal polyps,CRSw NP）及正常鼻粘膜组织中的表达,并比较A20在各亚型慢性鼻窦炎中的表达差异,探讨可能干预CRSw NP的分子机制,为其治疗策略提供新的思路。方法:选取30例2021.01～2021.10期间于南华大学附属第一医院耳鼻咽喉科行鼻内镜下鼻息肉切除的患者,术前采集患者血清中嗜酸粒细胞（eosinophil,EOS）占比情况及鼻窦CT扫面Lund-Mackay评分。手术过程中切取适量大小的鼻息肉留存为标本,进行苏木精-伊红染色（hematoxylin-eosin,HE）,由病理科医师和实验实施者在盲法下随机选取8个高倍视野（high-power field,HPF）,计算炎症细胞总数及EOS占比,确定以EOS数量在炎性细胞浸润总数中占比＞10%/HPF时为嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎伴鼻息肉（eosinophilic chronic rhinosinusitis with nasal polyps,E-CRSw NP）,以EOS数量在炎性细胞浸润总数中占比＜10%/HPF时为非嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎伴鼻息肉（non-eosinophilic chronic rhinosinusitis with nasal polyps,non-ECRSw NP）为标准,将CRSw NP患者分为Eos-CRSw NP组和non-ECRSw NP组。同时选取同期于我院行鼻中隔偏曲矫正术的患者,术中切取下鼻甲粘膜组织作为空白对照组标本。采用HE染色法测定组织学变化情况及炎性细胞表达情况;采取免疫组织化学技术（immunohistochemistry,IHC）和Western Blot检测各实验组中A20的表达情况;采取pearson’s相关性检验对E-CRSw NP组及non-ECRSw NP组中A20的表达与血清中EOS比例、组织中EOS计数、Lund-Mackay评分的相关性进行分析。结果:HE染色结果显示:E-CRSw NP组中鼻息肉粘膜纤毛上皮结构紊乱,基底膜明显增厚,间质内可见高度水肿,大量EOS浸润;non-ECRSw NP组中上皮细胞增生变厚,间质内可见明显水肿,上皮层及间质内可见炎症细胞浸润,以中性粒细胞及淋巴细胞浸润为主;健康对照组中,粘膜为正常假复层纤毛柱状上皮,基底膜无增厚及破坏,间质可见个别炎性细胞散布。IHC结果显示:A20表达主要定位在鼻粘膜上皮细胞质中,E-CRSw NP组中可见相对较多的阳性表达,呈现棕色或棕黄色;Non-ECRSw NP组中可见少量A20淡棕色阳性表达,染色强度弱于E-CRSw NP组;对照组中偶见A20在上皮细胞质中呈淡黄色阳性表达,染色强度明显弱于E-CRSw NP组与Non-ECRSw NP组。Western Blot检测结果示:A20在E-CRSw NP组、Non-ECRSw NP组、对照组中,于90KDa处有明显的免疫反应性条带,免疫反应条带在对照组中明显弱于E-CRSw NP组与Non-ECRSw NP组,以E-CRSw NP组中表达最强。采用quantity one专业灰度分析软件进行半定量分析免疫反应性条带灰度值,可见E-CRSw NP组A20条带的灰度值显著高于Non-ECRSw NP组,对照组A20条带灰度值明显弱于Non-ECRSw NP组,差异均具有统计学意义（P＜0.05）;经pearson’s相关性检验,E-CRSw NP组中,血清中EOS比例、息肉组织中EOS计数、Lund-Mackay评分与A20的表达呈正相关（P＜0.05）;non-ECRSw NP组中,血清中EOS比例、息肉组织中EOS计数与A20的表达无明显相关性（P＞0.05）,Lund-Mackay评分与A20的表达有显著相关性,呈正相关（P＜0.05）。结论:A20表达于人体鼻粘膜组织中,嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者的息肉组织中A20表达上调;慢性鼻-鼻窦炎的严重程度与A20的表达呈正相关。
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