【摘 要】
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目的 从对初级胆汁酸合成的影响,探讨醋炙增强乳香改善溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的作用机制.方法 基于2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid,TNBS)法建立UC大鼠模型,采用超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-TQ-MS)法测定大鼠血浆中6种初级胆汁酸含量;进一步借助L-02肝细胞模型,围绕初级胆汁酸合成场所肝脏,探究乳香醋炙前后及醋炙前后差异成分3-乙酰-9,11-去氢-β-乳香酸(3-acetyl-9,11-deh
【机 构】
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中国中医科学院中医基础理论研究所,北京100700;浙江省食品药品检验研究院国家药品监督管理局中成药质量评价重点实验室,浙江杭州310052
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目的 从对初级胆汁酸合成的影响,探讨醋炙增强乳香改善溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的作用机制.方法 基于2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid,TNBS)法建立UC大鼠模型,采用超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-TQ-MS)法测定大鼠血浆中6种初级胆汁酸含量;进一步借助L-02肝细胞模型,围绕初级胆汁酸合成场所肝脏,探究乳香醋炙前后及醋炙前后差异成分3-乙酰-9,11-去氢-β-乳香酸(3-acetyl-9,11-dehydro-β-boswellic acid,ADHBA)的干预作用,以ELISA法考察胆汁酸前体胆固醇变化,采用qRT-PCR法测定游离型初级胆汁酸合成酶胆固醇7α-羟化酶(cholesterol7α-hydroxylase,CYP7A1)、甾醇12α-羟化酶(sterol12α-hydroxylase,CYP8B1)、甾醇-27-羟化酶(27-hydroxycholesterol,CYP27A1)、氧甾醇-7α-羟化酶(oxysterol-7α-hydroxylase,CYP7B1)、结合型初级胆汁酸合成酶胆汁酰基辅酶A合成酶(bile acyl-CoA synthetase,BACS)和胆汁酸-辅酶A:氨基酸正酰基转移酶(bile acid-CoA:amino acidN-acyltransferase,BAAT) mRNA表达水平.结果 乳香醋炙后,对UC模型大鼠血浆中的初级胆汁酸总量和游离型、结合型初级胆汁酸总量的回调水平更接近正常组.乳香、醋乳香、醋炙前后差异成分ADHBA均可降低胆汁酸合成前体胆固醇水平,但以醋乳香及ADHBA的调控作用更加明显.醋乳香对游离型初级胆汁酸合成经典途径中CYP7A1的抑制和CYP8B1的上调作用以及对结合型初级胆汁酸合成酶BACS、BAAT的上调作用强于乳香组,乳香联合ADHBA组同醋乳香组上调作用一致.结论 乳香醋炙后对初级胆汁酸合成调控作用主要是基于其对游离型初级胆汁酸经典合成途径中限速酶CYP7A1的抑制,回调机体在UC病理状态下的初级胆汁酸水平,进而增强乳香对UC的改善作用;ADHBA可能为乳香醋炙增效的物质基础之一.
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