【摘 要】
：
组织(或细胞)的蛋白质提取效率直接影响蛋白质双向凝胶电泳(2-DE)的分辨率.为探索建立适用于人乳腺癌细胞株MCF-7蛋白质提取的最佳条件,比较目前在双向凝胶电泳中常用的3种蛋
【机 构】
：
浙江大学生命科学学院,浙江大学医学院浙江省生物电磁学重点研究实验室,浙江大学医学院浙江省生物电磁学重点研究实验室
【基金项目】
：
国家自然科学基金项目(No.50137030,30170792);浙江省自然科学基金项目(No.301524);浙江省卫生厅重点项目(No.2004ZD006)资助~~
论文部分内容阅读
组织(或细胞)的蛋白质提取效率直接影响蛋白质双向凝胶电泳(2-DE)的分辨率.为探索建立适用于人乳腺癌细胞株MCF-7蛋白质提取的最佳条件,比较目前在双向凝胶电泳中常用的3种蛋白质提取方法对MCF-7细胞总蛋白的提取效率.MCF-7细胞经培养后,分别采用M-PER试剂、标准裂解液或含硫脲裂解液提取其总蛋白质,然后进行双向凝胶电泳,并根据凝胶上蛋白质斑点的丰度和分布特点判断所得双向电泳图谱的质量,以确定MCF-7细胞蛋白质提取的相对最佳方法.结果显示,M-PER试剂法得到的图谱分辨率较低,蛋白质主要集中分布在分子量15~70kD,pH4.7~6.3的范围内;标准裂解液法得到的图谱分辨率有所提高,蛋白质分布比M-PER试剂法得到的图谱广;硫脲裂解液法得到的图谱是三者中分辨率最高的,尤其是高丰度蛋白和高分子量蛋白分离效果比前两者好.结果表明,在3种常用的蛋白质提取方法中,硫脲裂解液对细胞蛋白质的溶解性最佳,相对更适合于提取MCF-7细胞的蛋白质,并与双向凝胶电泳条件更兼容.
其他文献
吉林省白山市板石沟铁矿是典型的沉积变质铁矿,矿区内构造作用和变质作用复杂。沉积变质型铁矿成矿构造环境一般分为原生成矿构造环境和次生成矿构造环境,前人对板石沟铁矿构
目的探讨免疫治疗前、后尘螨变应性鼻炎患者特异性IgG4(specific IgG4,sIgG4)水平的变化。方法屋尘螨变应性鼻炎患者25例随机分为治疗组15例和对照组10例,治疗组按计划疗程皮
作为劳动者合同解除权的立法研究,本文从该权利本身的属性出发,结合理论上的争议,形成了对劳动者合同解除权的认识。在此基础上,通过对国内立法的评析和对国外立法的比较与借
<正>全国社会保险标准委员会于2009年7月30日成立了,这是一个里程碑,标志着中国社会保险将进入标准化发展轨道。标准化就是在专业性的基础上更加关
本文简要分析了目前应急制图的难点,结合广东省地理信息公共服务平台的建设成果,提出了基于共享平台的在线快速应急制图技术方案,阐述了该方案的应用优点、设计流程、关键技
目前高校勤工助学体系运行和校园快递包装盒回收都存在着不足。针对这些问题,以南京某大学为例进行调研,通过问卷调查法,运用统计数据分析,在探索目前高校勤工助学体系和校园
建设交通强国,创新是重要的发展驱动力。《中国水运》杂志作为交通运输部主管的全国优秀科技期刊,一直坚持守正创新,充分发挥在在交通运输创新体系中的作用,加快数字化出版和
【目的】为了获得高产漆酶的菌株用于降解木质素.【方法】从新乡周边腐木堆积处、秸秆堆积处和造纸厂废水这些木质素含量丰富的地方取样,以木质素为唯一碳源,初筛出对木质素