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目的:探讨骨髓间充质干细胞在体外定向,分化为脂肪细胞的适宜诱导条件.
方法:无菌条件下分离大鼠股骨,密度梯度离心法与贴壁培养法相结合分离、纯化骨髓间充质干细胞并在体外进行培养.第3代骨髓间充质平细胞完全汇合后,利用含有3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、吲哚美辛、地塞米松、胰岛素及胎牛血清的DMEM低糖培养液定向诱导骨髓间充质干细胞分化为脂肪细胞.
结果:①倒置显微镜下观察,传3代后可获得均一性较高的骨髓间充质干细胞,经过诱导研定向分化成脂肪细胞.②在3-异丁基1-甲基黄嘌呤、吲哚美辛、地塞米松诱导的条件下,采取间断诱导方法,骨髓间充质干细胞在体外可定向分化为脂肪细胞.③实验中用5×104mol/L IBMX,2×104mol/L吲哚美辛,104mol/L地塞米松诱导间充质干细胞的成脂分化效果较好.
结论:骨髓间充质干细胞经含0.1mmol/L3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、10mg/L胰岛素、0.1mmol/L吲哚美辛、1μmol/L地塞米松、体积分数为10%胎牛血清的DMEM分化诱导液定向诱导可获得较好的成脂分化效果.