【摘 要】
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目的:克隆出五步蛇的类凝血酶cDNA,为研究其结构和功能的关系,并为下一步基因表达开发抗血栓药物提供依据和基础.方法:从五步蛇蛇腺中提取了总RNA,通过反转录合成第一链cDNA,
【机 构】
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广西肿瘤研究所,南宁,530021
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目的:克隆出五步蛇的类凝血酶cDNA,为研究其结构和功能的关系,并为下一步基因表达开发抗血栓药物提供依据和基础.方法:从五步蛇蛇腺中提取了总RNA,通过反转录合成第一链cDNA,经PCR 扩增出五步蛇毒腺中类凝血酶TLE1的cDNA片段,并将其连接到质粒载体扩增,然后进行DNA测序.结果:成功克隆出一种新的五步蛇类凝血酶的cDNA片段.此片段全长794bp,包括编码部分的全长为777bp.推导其编码的蛋白质序列为258个氨基酸,其中包括18个氨基酸的信号肽,6个氨基酸的前肽和234个氨基酸的成熟氨基酸顺序.TLE1成熟肽与其它蛇毒类凝血酶相比,蛋白质一级结构具有较高的同源性.结论:从五步蛇中成功克隆出一种新的类凝血酶cDNA,并确定了它的DNA顺序.
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