青霉素酶基因异源表达及该酶分解牛奶中残留青霉素的研究

来源 :微生物学通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiexieni777
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以获得大量青霉素酶并将其用于分解牛奶中残留青霉素为目的,通过PCR方法从蜡样芽孢杆菌ATCC10987基因组中获得了青霉素酶基因,将该基因克隆至表达载体pET28a(+)中,并转化到E.coli BL21中;在IPTG诱导下对目的蛋白进行SDS-PAGE和酶活分析,结果显示最大酶活力可达到480.0 U/mL;利用Ni2+亲合层析柱纯化目的蛋白,纯化后的目的蛋白纯度超过90%;采用高碘酸钠氧化法制备固定化的青霉素酶,并利用该固定化酶将牛奶(含0.5U青霉素G/mL)中的青霉素分解到浓度小于4ppb程度。
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