免疫组织化学-激光显微切割-聚合酶链反应技术在胃癌石蜡切片中检测p53突变的应用

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目的 探索在石蜡切片中应用免疫组织化学-激光显微切割-聚合酶链反应(PCR)技术,检测进展期胃癌p53蛋白表达阴性或阳性的p53基因外显子5~8的突变情况.方法对41例进展期胃癌标本进行p53蛋白的免疫组织化学标记,再用激光显微切割(LMD)技术切取p53表达一致的癌组织及远离癌灶的正常胃黏膜腺体.经消化后直接进行p53基因外显子5~8的PCR扩增、单链构象多态性分析及直接测序.结果41例进展期胃癌标本均扩增出特异的目的条带.其中有11例p53蛋白表达阳性,15例p53基因检测到突变.蛋白表达阳性者中有8例突变(8/11);表达阴性者中有7例突变(7/30,23.3%).p53蛋白表达和p53基因突变具显著相关(P=0.004).结论免疫组织化学-LMD-PCR技术应用于石蜡切片可获得满意的结果,此技术可将细胞特定基因的结构状态和表达水平很好地结合起来检测分析。

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