探讨外泌体源性微小RNA(miR)-124对创伤性脑损伤(TBI)大鼠急性期损伤区脑组织中小胶质细胞活化状态的作用，为TBI后神经炎症的干预提供实验依据。
方法(1)将体外培养的HEK293细胞分为miR-124转染组和对照组，分别转染载有miR-124的质粒和空质粒，2~3周后分离出单克隆细胞系，继续培养2周后应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测2组细胞miR-124的含量；应用美国系统生物科技(SBI)试剂盒从2组细胞上清液中提取外泌体，电镜下观察外泌体的形态，应用Western blotting检测2组外泌体表面标记分子CD63的表达，RT-PCR检测2组外泌体内miR-124的含量。(2)60只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(n=12)、TBI组(n=24)和外泌体组(n=24)，后2组大鼠应用控制性皮层撞击(CCl)法建立TBI模型。造模后24 h，外泌体组大鼠通过尾静脉注入外泌体(3×109个微粒)，假手术组和TBI组大鼠注入等量溶剂。造模后3 d，应用RT-PCR检测3组大鼠损伤区脑组织miR-124的表达，流式细胞术(FCM)检测脑组织Iba-1+/CD32+和Iba-1+/CD206+小胶质细胞所占百分比，酶联免疫吸附实验(ELISA)检测脑组织促炎因子白介素(IL)-1、IL-6和抑炎因子IL-4、IL-10的表达。
结果(1)RT-PCR检测显示miR-124转染组细胞miR-124的表达高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。电镜下显示有直径约100 nm的球形微小颗粒，并有明显的膜性结构；Western blotting检测显示miR-124转染组外泌体表面标记分子CD63的表达量明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；RT-PCR检测显示miR-124转染组外泌体miR-124的含量明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。(2)外泌体组大鼠损伤脑组织中miR-124的表达高于TBI组和假手术组，差异有统计学意义(P<0.05)。与假手术组比较，TBI组大鼠损伤脑组织Iba-1+/CD32+和Iba-1+/CD206+小胶质细胞所占百分比增加、IL-1、IL-6和IL-4、IL-10的浓度增加，差异有统计学意义(P<0.05)；与TBI组比较，外泌体组大鼠损伤脑组织中Iba-1+/CD32+小胶质细胞所占百分比降低，Iba-1+/CD206+小胶质细胞所占百分比增高，IL-1、IL-6的浓度降低，IL-4、IL-10的浓度增加，差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论外泌体源性miR-124可以促进TBI急性期损伤脑组织中小胶质细胞由M1型向M2型转化，从而减轻TBI的神经炎症。