【摘 要】
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目的 观察转录因子激活蛋白4(AP-4)基因对结肠癌细胞株SW480生物学行为的影响.方法 设计合成针对AP-4基因外显子7的小分子干扰RNA(siRNA)表达质粒,用脂质体转染SW480细胞,通
【机 构】
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广州医学院附属广州市第一人民医院胃肠外科
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目的 观察转录因子激活蛋白4(AP-4)基因对结肠癌细胞株SW480生物学行为的影响.方法 设计合成针对AP-4基因外显子7的小分子干扰RNA(siRNA)表达质粒,用脂质体转染SW480细胞,通过RT-PCR技术、Western印迹、四甲基偶氮唑盐实验(MTT法)、流式细胞仪和Transwe ll体外侵袭实验等检测该siRNA对SW480细胞基因表达、细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡能力和浸润转移能力等生物学行为的影响.结果 AP-4 siRNA转染SW480细胞96 h后,其AP-4 mRNA水平下降了58%,培养液上清AP-4蛋白浓度下降了75%(P＜0.01).细胞增殖受到明显抑制,抑制率达61%～78%;流式细胞仪检测结果显示,AP-4 siRNA组SW480细胞凋亡率为(21.70±2.51)%,显著高于阴性对照组的(2.31±0.14)%(P＜0.01),G0-G1期细胞比例增加(P＜0.01),G2-M期细胞减少(P＜0.05);Transwe ll体外侵袭实验显示,AP-4 siRNA能明显抑制SW480细胞的体外侵袭力(P＜0.01).结论 应用siRNA技术沉默AP-4基因能有效抑制SW-480细胞AP-4的表达,进而抑制细胞的生长、增殖及诱导细胞的凋亡,为以AP-4为靶向的结肠癌基因治疗提供了新的思路和手段.
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