【摘 要】
：
为了建立无筛选标记基因的转Fat-1基因绵羊细胞系,本研究将PCR克隆得到的Fat-1基因,合成的attB、Loxp序列并克隆入pN1-EGFP框架载体,得到可删除筛选标记基因的pEGFP-N1-Fat-1
【机 构】
：
内蒙古农业大学生命科学学院内蒙古自治区生物制造重点实验室;
【基金项目】
：
内蒙古生物高科技项目(No.20030301)资助~~
论文部分内容阅读
为了建立无筛选标记基因的转Fat-1基因绵羊细胞系,本研究将PCR克隆得到的Fat-1基因,合成的attB、Loxp序列并克隆入pN1-EGFP框架载体,得到可删除筛选标记基因的pEGFP-N1-Fat-1真核表达载体。体外转录合成phiC31整合酶mRNA并与线性化的pEGFP-N1-Fat-1载体共转染绵羊胎儿皮肤成纤维细胞,G418筛选得到表达绿色荧光的单克隆,再利用pET-28a-His-NLS-TAT-Cre质粒诱导Cre重组蛋白表达,将纯化后的Cre穿膜肽转导表达绿色荧光的单克隆细胞,将荧光淬灭的细胞系扩繁,提取基因组DNA,进行PCR及测序鉴定,得到无标记转Fat-1基因绵羊胎儿皮肤成纤维细胞系,为生产无筛选标记基因的转基因绵羊奠定基础。
其他文献
田径后备人才培养是田径运动可持续发展的源泉,后备人才培养在一定程度上决定了田径运动能否长盛不衰及健康可持续发展。赣州地区作为我国“田径之乡”为我国田径运动发展输
<正>供给侧结构性改革,对于山西而言意义尤为重要。由于全球经济疲软带来的一系列连锁反应导致煤价下跌,使得山西省属五大煤炭集团2015年负债率达81.79%。全国两会上,山西省
粮食是国民经济的基础,而小麦在中国的粮食生产中占有非常重要的地位,小麦的产量和品质关系到国家经济的发展和人们的日常生活。因此,对小麦生产技术进行研究分析从而达到小
岭南之鹏城久有医府日“南岭”，其下之康乐社区健康服务中心立于丁亥年初冬，距今二年余。社区健康服务中心的功能日趋完善，逐渐获得了居民的认可，现就初期建设的经验诉诸笔端，希望
针对目前在开发煤矿web信息系统中对GIS图形的需求,在分析比较的基础上,设计出一种合理的图形开发方案,即利用sharpmap开源地理信息系统平台作为图形服务器,FME软件进行数据
<正>当初产妇首次进入待产室和分娩室,环境生疏,难免出现情绪紧张,医护人员的一言一行都会对其心理产生很大影响。良好的第一印象,会对其产生信任和安全感,耐心、细致的服务,
<正>传统的古诗词教学多是教师讲、学生听,然后总结出相关的知识重点后进行死记硬背。这种教学方法,不仅影响了学生的听课质量,也不利于学生古诗词学习兴趣的形成。如何在当
《未来属于我们：预见未来、设计未来并创造未来》目前，人们必须解决一个迫在眉睫的问题——如何准确地作出经济预测？政府和企业部门为此作出了不懈的努力。此外，对于未来学家来
地方财政收入的分析和预测是有关部门制定合理的财政政策和财政预算、强化地方财政收入监督管理的有效途径.本文试图运用国际经济理论和分析方法,建立一种地方财政收入的预测
自改革开放以来,我国与其他国家之间的经济、政治交流越来越密切,越来越频繁,英语已经成为各国之间进行良好沟通的最主要的语言,在日常生活中的运用也越来越广泛。我国对英语