【摘 要】
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目的:建立柱前衍生化HPLC法测定藏药熏倒牛种子中15种氨基酸的含量.方法:供试品在一定量6 moL·L-1盐酸中110℃水解6h,与异硫氰酸苯酯进行衍生化反应.采用CAPCELL PAK-C18 (250 mm ×4.6 mm,5μm)色谱柱,以80％乙腈溶液(A)-0.056 moL· L-1乙酸钠缓冲液(B)为流动相,梯度洗脱(0～15 min,5％ A;15 ～20 min,5％A→20％A;20～35 min,20％A→36％A;35～45 min,36％ A→70％ A;45 ～50 min,
【机 构】
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兰州市食品药品检验检测研究院/甘肃省种植中药材外源性污染物监测工程研究中心,甘肃兰州730000;兰州大学药学院,甘肃兰州730000;甘肃中医药大学药学院,甘肃兰州730000;兰州市食品药品检验检
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目的:建立柱前衍生化HPLC法测定藏药熏倒牛种子中15种氨基酸的含量.方法:供试品在一定量6 moL·L-1盐酸中110℃水解6h,与异硫氰酸苯酯进行衍生化反应.采用CAPCELL PAK-C18 (250 mm ×4.6 mm,5μm)色谱柱,以80％乙腈溶液(A)-0.056 moL· L-1乙酸钠缓冲液(B)为流动相,梯度洗脱(0～15 min,5％ A;15 ～20 min,5％A→20％A;20～35 min,20％A→36％A;35～45 min,36％ A→70％ A;45 ～50 min,70％→90％A;50～55 min,90％ A;55～56 min,90％A→5％A;56 ～60 min,5％A),流速为1.0 mL·min-1,检测波长254 nm,色谱柱温度40℃.结果:15种氨基酸衍生物能够达到基线分离,在0.96～58.56μg·mL-1范围内线性关系良好,r≥0.9991,精密度、重复性、稳定性试验的RSD值分别小于2.73％、2.85％、2.89％,加样回收率介于95.2％～104.4％之间,RSD值均小于2.46％.经测定,3批熏倒牛种子中氨基酸总含量分别为1.64％、1.55％和1.08％.结论:此法简便易行,可用于藏药熏倒牛种子中15种氨基酸的含量测定.
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