HCV C区基因片段的克隆、表达及纯化

来源 :中国生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zhuguangpo123

【摘要】

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目的研究HCV C区片段在大肠杆菌中的表达及纯化工艺.方法采用RT-PCR技术,从HCV感染者血清中克隆C区基因片段,插入pET28a(+)质粒中,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达.采用亲和层析

【作者】

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朱为刘桂珍史晓明宣维平钟平

【机构】

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上海生物制品研究所

【出处】

：

中国生物制品学杂志

【发表日期】

：

2001年1期

【关键词】

：

HCV C区基因 RT-PCR 表达 HCV Core gene RT-PCR Expression

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目的研究HCV C区片段在大肠杆菌中的表达及纯化工艺.方法采用RT-PCR技术,从HCV感染者血清中克隆C区基因片段,插入pET28a(+)质粒中,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达.采用亲和层析或Saphacryl S-200柱层析纯化抗原.结果两种纯化工艺的收率分别为58mg/L和95mg/L发酵液.SDS-PAGE显示纯度分别为98%和90%.ELISA检测纯化抗原具有较好的抗原性和特异性.结论两种纯化工艺简便,重组蛋白纯度高,可用于ELISA试验.

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