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【摘 要】目的：探讨胶体金法检测肺炎支原体和衣原体抗体在儿科呼吸道感染诊断中的应用。方法：应用肺炎支原体、衣原体胶体金试剂盒对怀疑呼吸道感染儿科患者血清标本进行检测。结果：检测出肺炎支原体、衣原体感染在儿童呼吸道感染中占21.6%。结论：在本地区儿科呼吸道感染中，肺炎支原体和衣原体感染占有较大的比例。胶体金法检测用于诊断肺炎支原体和衣原体快速方便，值得在基层医院推广。
【关键词】肺炎支原体；肺炎衣原体；胶体金法；检测
【中图分类号】R725 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2013）05-0722-01
肺炎支原体、衣原体是介于细菌和病毒之间的微生物。支原体、衣原体侵人体后，可粘附在呼吸道上皮细胞表面的受体上引起肺部感染。是呼吸道感染的重要病原体，并可造成家庭、社区流行[1]。本文就我院从2011年3月20日至2012年6月20日期间在我院儿科住院，且具有流涕、鼻塞、咳嗽、发热等症状，怀疑呼吸道感染的儿童2215例进行肺炎支原体、衣原体抗体检测分析。现将方法和结果报告如下。
1 材料与方法
1.1试剂来源和方法
肺炎支原体抗体检测试剂盒（胶体金法），肺炎衣原体抗体检测试剂盒（胶体金法），均由山东康华生物技术有限公司生产。
1.2病人来源
本院的儿科住院患者，经临床初步诊断，怀疑是呼吸道感染的儿童，年龄最大的10岁3个月，最小的2个月；男1231例，女984例。
1.3标本收集与处理
抽患者静脉血作为标本，用没有加任何抗凝物质的真空采血管，标本放置37°C水浴箱孵育1小时，离心获取血清标本。
1.4标本检测
严格按照操作规程进行检测，同时测定患儿的肺炎支原体、肺炎衣原体[2]。
2 检测结果
2.1检测结果见如下表格：
2.2结果分析：
检测结果，无论男性或女性患儿，单项支原体阳性率均大于单项衣原体阳性率；总支原体检测的阳性率大于总衣原体的阳性率；证明支原体感染率高于衣原体。支原体总感染率为19.8%、衣原体总感染率为13.2%，与文献报道基本一致[3]。支原体和衣原体阳性率都是女孩高于男孩，原因不十分明确，可能提示男孩免疫力高于女孩。支原体、衣原体同时阳性率大于单独的支原体、衣原体阳性率，证明支原体、衣原体同时感染的可能性较高。在全部2215例患儿中，无论支原体或是衣原体只要其中一项是阳性的有478例，占总数的21.6%，证明支原体、衣原体感染在本地区儿科住院患儿呼吸道感染中占重要地位，是儿童呼吸道感染的重要病原体之一，必须引起重视。
3讨论
3.1方法学讨论
胶体金法检测抗体的最大优势是快速，但本法对于环境、检测人员的工作经验与操作的严谨性、对结果的准确判断分析都有严格的要求。操作前必须认真阅读试剂盒上的说明书，严格遵守操作规程。如室温必须是20～35°C，试剂盒从冰箱中取出必须复温等。不得将标本在室温中放置时间过长或进行冰冻，以免使抗体效价下降。必须使用新鲜血清，不能用含有抗凝剂或促凝剂的试管，因其可导致非特异性吸附增多，造成假阳性。如标本有高脂、呈乳糜状，可延长标本的离心时间。每步操作须环环相扣，但忌急躁冒进。要在规定的时间内报结果，超出规定时间报出结果无效[4]。更換试剂盒批号，必须同时做阴阳性对照，刚开始做阳性对照时，可以把阳性对照对比稀释测滴度，以判定检测试剂的灵敏度。胶体金法检测支原体、衣原体抗体，在标本采集后2小时内即可出结果，比其它方法如ELISA等要快速。PCR核酸检测法快速、敏感、特异，但一般基层实验室不易操作[5]。
3.2结果讨论
在儿科住院患儿中，呼吸道感染占很大的比例，而支原体、衣原体感染在所有呼吸道感染的患儿中又占有一个较高的比例。胶体金法检测肺炎支原体和衣原体抗体，快速且在大多数医院（包括基层医院）可操作性强，有利于对儿科呼吸道感染的诊断，值得在在基层医院推广。
参考文献：
[1] 顾兆坤 顾可梁主编 儿科临床与检验 上海医科大学出版社 1999（1）-178-181。
[2] 康华生物 肺炎支原体抗体检测试剂盒（胶体金法）说明书2009--11--26。肺炎衣原体抗体检测试剂盒（胶体金法）说明 2010--3--12。
[3] 王慕逖 主编 儿科学 人民卫生出版社 2002（5）282
[4] 科华生物报 第26期 金标渗滤产品客户答疑
[5] 洪秀华 主编 临床微生物学检验 中国医药科技出版社 2004（1）392。
【关键词】肺炎支原体；肺炎衣原体；胶体金法；检测
【中图分类号】R725 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2013）05-0722-01
肺炎支原体、衣原体是介于细菌和病毒之间的微生物。支原体、衣原体侵人体后，可粘附在呼吸道上皮细胞表面的受体上引起肺部感染。是呼吸道感染的重要病原体，并可造成家庭、社区流行[1]。本文就我院从2011年3月20日至2012年6月20日期间在我院儿科住院，且具有流涕、鼻塞、咳嗽、发热等症状，怀疑呼吸道感染的儿童2215例进行肺炎支原体、衣原体抗体检测分析。现将方法和结果报告如下。
1 材料与方法
1.1试剂来源和方法
肺炎支原体抗体检测试剂盒（胶体金法），肺炎衣原体抗体检测试剂盒（胶体金法），均由山东康华生物技术有限公司生产。
1.2病人来源
本院的儿科住院患者，经临床初步诊断，怀疑是呼吸道感染的儿童，年龄最大的10岁3个月，最小的2个月；男1231例，女984例。
1.3标本收集与处理
抽患者静脉血作为标本，用没有加任何抗凝物质的真空采血管，标本放置37°C水浴箱孵育1小时，离心获取血清标本。
1.4标本检测
严格按照操作规程进行检测，同时测定患儿的肺炎支原体、肺炎衣原体[2]。
2 检测结果
2.1检测结果见如下表格：
2.2结果分析：
检测结果，无论男性或女性患儿，单项支原体阳性率均大于单项衣原体阳性率；总支原体检测的阳性率大于总衣原体的阳性率；证明支原体感染率高于衣原体。支原体总感染率为19.8%、衣原体总感染率为13.2%，与文献报道基本一致[3]。支原体和衣原体阳性率都是女孩高于男孩，原因不十分明确，可能提示男孩免疫力高于女孩。支原体、衣原体同时阳性率大于单独的支原体、衣原体阳性率，证明支原体、衣原体同时感染的可能性较高。在全部2215例患儿中，无论支原体或是衣原体只要其中一项是阳性的有478例，占总数的21.6%，证明支原体、衣原体感染在本地区儿科住院患儿呼吸道感染中占重要地位，是儿童呼吸道感染的重要病原体之一，必须引起重视。
3讨论
3.1方法学讨论
胶体金法检测抗体的最大优势是快速，但本法对于环境、检测人员的工作经验与操作的严谨性、对结果的准确判断分析都有严格的要求。操作前必须认真阅读试剂盒上的说明书，严格遵守操作规程。如室温必须是20～35°C，试剂盒从冰箱中取出必须复温等。不得将标本在室温中放置时间过长或进行冰冻，以免使抗体效价下降。必须使用新鲜血清，不能用含有抗凝剂或促凝剂的试管，因其可导致非特异性吸附增多，造成假阳性。如标本有高脂、呈乳糜状，可延长标本的离心时间。每步操作须环环相扣，但忌急躁冒进。要在规定的时间内报结果，超出规定时间报出结果无效[4]。更換试剂盒批号，必须同时做阴阳性对照，刚开始做阳性对照时，可以把阳性对照对比稀释测滴度，以判定检测试剂的灵敏度。胶体金法检测支原体、衣原体抗体，在标本采集后2小时内即可出结果，比其它方法如ELISA等要快速。PCR核酸检测法快速、敏感、特异，但一般基层实验室不易操作[5]。
3.2结果讨论
在儿科住院患儿中，呼吸道感染占很大的比例，而支原体、衣原体感染在所有呼吸道感染的患儿中又占有一个较高的比例。胶体金法检测肺炎支原体和衣原体抗体，快速且在大多数医院（包括基层医院）可操作性强，有利于对儿科呼吸道感染的诊断，值得在在基层医院推广。
参考文献：
[1] 顾兆坤 顾可梁主编 儿科临床与检验 上海医科大学出版社 1999（1）-178-181。
[2] 康华生物 肺炎支原体抗体检测试剂盒（胶体金法）说明书2009--11--26。肺炎衣原体抗体检测试剂盒（胶体金法）说明 2010--3--12。
[3] 王慕逖 主编 儿科学 人民卫生出版社 2002（5）282
[4] 科华生物报 第26期 金标渗滤产品客户答疑
[5] 洪秀华 主编 临床微生物学检验 中国医药科技出版社 2004（1）392。