【摘 要】
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通过RT-PCR方法扩增小鼠4-1BBL cDNA,以pEGFP-N1为载体,构建融合蛋白4-1BBL-GFP重组表达质粒p4-1BBL-GFP.采用基于流体力学原理建立的裸DNA体内转染技术,从小鼠尾静脉快速(15
【机 构】
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武汉大学中南医院放化疗科,华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(973计划)
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通过RT-PCR方法扩增小鼠4-1BBL cDNA,以pEGFP-N1为载体,构建融合蛋白4-1BBL-GFP重组表达质粒p4-1BBL-GFP.采用基于流体力学原理建立的裸DNA体内转染技术,从小鼠尾静脉快速(15 s)注射质粒p4-1BBL-GFP进行体内转染.荧光显微镜观察组织切片,见小鼠肝、脾、肾及肺中均有报告基因GFP表达,尤以肝细胞中荧光最强.进一步用Western印迹和免疫组织化学染色法确定肝细胞表面表达4-1BBL,用Hsp70-H22细胞抗原肽皮下免疫小鼠,同时尾静脉注射质粒p4-1 B
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