丙型肝炎病毒1b DY株ns5a基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

来源 :西安交通大学学报：医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：Z12456879

【摘要】

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目的克隆和表达丙型肝炎病毒（HCV）1b型地方株DY株ns5a基因。方法运用原核细胞基因工程技术。设计目的基因的特异引物，采用巢式PCR法，从含HCV1bDY株全长eDNA的质粒HCV17中扩增出约

【作者】

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付慧楚雍烈张丽莉曹美茹成凡茹小荣王勇健

【机构】

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西安医学院生物化学教研室,西安交通大学医学院病原生物学教研室

【出处】

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西安交通大学学报：医学版

【发表日期】

：

2007年4期

【关键词】

：

丙型肝炎病毒 ns5a基因基因表达 hepatitis C virus （HCV） ns5a gene gene expression

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（No.30470089）,国家高技术研究发展计划（863）资助项目（No、2002AA21416）

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目的克隆和表达丙型肝炎病毒（HCV）1b型地方株DY株ns5a基因。方法运用原核细胞基因工程技术。设计目的基因的特异引物，采用巢式PCR法，从含HCV1bDY株全长eDNA的质粒HCV17中扩增出约480bp的目的片段，将其插入克隆载体pMD18-Tvector中，再亚克隆到原核表达载体pET-28a中；经酶切、PCR及测序鉴定后转化入BL21菌株，在IPTG诱导下进行融合蛋白的表达；采用SDS-PAGE电泳及Western-blot检测NS5A蛋白的表达水平。结果成功构建了含有HCV1b DY株ns5a

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