目的 探讨小干扰RNA(siRNA)下调T细胞淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam1)表达对食管鳞癌EC9706细胞的影响.方法 利用Tiam1 siRNA转染食管鳞癌EC9706细胞,采用实时荧光定量PCR和Western blot检测转染后Tiam1 mRNA和蛋白的表达,CCK-8试剂盒分析转染后细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况,Western b1ot检测细胞周期相关蛋白和细胞凋亡相关蛋白的表达.结果 未处理组和对照siRNA组EC9706细胞中Tiam1 mRNA的相对表达水平分别为1.00和0.95±0.02,差异无统计学意义(P＞0.05).Tiam1 siRNA转染24、48、72 h后,EC9706细胞中Tiam1 mRNA的相对表达水平分别为0.30 ±0.04、0.09 ±0.01和0.09 ±0.006,与未处理组比较差异均有统计学意义(均P＜0.05).转染Tiam1 siRNA 24 h后,EC9706细胞中Tiam1蛋白的表达水平(0.11 ±0.02)低于未处理组(0.44±0.05)和对照siRNA组(0.44±0.04,均P＜0.05).Tiam1 siRNA组、未处理组和对照siRNA组Go/G1期细胞所占比例分别为(54.48±2.14)％、(40.69±1.85)％和(41.78±1.31)％,S期细胞所占比例分别为(27.18±1.65)％、(32.32±1.15)％和(30.35±1.09)％,差异均有统计学意义(均P＜0.01).未处理组、对照siRNA组和Tiam1siRNA组中cyclin D1蛋白的表达水平分别为0.43 ±0.02、0.41 ±0.01和0.11±0.02,p27蛋白的表达水平分别为0.10±0.01、0.09 ±0.02和0.20±0.02,差异均有统计学意义(均P＜0.05).未处理组、对照siRNA组和Tiam1 siRNA组中早期凋亡细胞所占比例分别为(10±0.9)％、(10±0.5)％和(27±0.7)％,差异有统计学意义(P＜0.01).未处理组、对照siRNA组和Tiam1 siRNA组EC9706细胞中Mcl-1蛋白的表达水平分别为0.47 ±0.12、0.48 ±0.13和0.16±0.02,Bcl-2蛋白的表达水平分别为0.49 ±0.08、0.50 ±0.05和0.04 ±0.03,caspase-3的活性分别为2.3±0.09、2.3±0.10和16.0±1.50,caspase-9的活性分别为2.3 ±0.08、2.3 ±0.11和14.5 ±0.9,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 Tiam1 siRNA能明显抑制食管鳞癌EC9706细胞的增殖、诱导细胞周期静止和细胞凋亡的发生,这与细胞周期基因(cyclin D1和p27)和细胞凋亡基因(Mcl-1、Bcl-1、caspase-3和caspase-9)的变化密切相关.
小干扰RNA下调T细胞淋巴瘤侵袭转移诱导因子1表达对食管鳞癌EC9706细胞的影响
【摘 要】
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目的 探讨小干扰RNA(siRNA)下调T细胞淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam1)表达对食管鳞癌EC9706细胞的影响.方法 利用Tiam1 siRNA转染食管鳞癌EC9706细胞,采用实时荧光定量PCR和Western blot检测转染后Tiam1 mRNA和蛋白的表达,CCK-8试剂盒分析转染后细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况,Western b1ot检测细胞周期相关蛋白
【机 构】
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(450003郑州大学附属肿瘤医院河南省肿瘤医院中西医结合科),(450003郑州大学附属肿瘤医院河南省肿瘤医院中西医结合科),(450003郑州大学附属肿瘤医院河南省肿瘤医院中西医结合科)
【出 处】
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中华肿瘤杂志
【发表日期】
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2014年36期
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