目的建立同时测定银翘散中绿原酸、连翘苷、牛蒡苷、甘草苷、甘草酸含量的方法。方法采用高效液相色谱法,以绿原酸、连翘苷、牛蒡苷、甘草苷、甘草酸为对照,色谱柱为Kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.4%磷酸溶液梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长230 nm,柱温为30℃。结果绿原酸、连翘苷、牛蒡苷、甘草苷、甘草酸分别在0.039 4～0.788、0.020 5～0.410、0.068～1.36、0.034 8～0.697和0.037 6～0.752μg内呈良好的线性关系,相关系数均大于0.999 6,平均回收率分别为101.3%(RSD=1.5%)、99.5%(RSD=1.2%)、98.7%(RSD=1.9%)、96.7%(RSD=2.3%)和98.2%(RSD=2.0%)。结论该法快速简便、准确可靠、重复性好,可用于银翘散中绿原酸、连翘苷、牛蒡苷、甘草苷、甘草酸含量测定,为银翘散及其类方制剂的质量评价提供研究基础。