目的 探讨氢化可的松对人外周血NK细胞增殖及其对胰腺癌SW1990细胞杀伤力的影响.方法 分离健康人外周血单个核细胞加入到含IL-15细胞因子的NK细胞培养基中诱导培养NK细胞.当NK细胞纯度达到70%以上时,加入10-6、10-5、10-4、10-3 μmol/L氢化可的松继续培养7d.以未加氢化可的松的NK细胞作为对照组.采用锥虫蓝染色计数细胞;采用流式细胞术检测CD3-CD56+ NK细胞含量及其穿孔素、颗粒酶B和IFN-γ的表达;以20∶1的效靶比将NK细胞与SW1990细胞共培养,用细胞增殖-毒性检验法(CCK-8)检测NK细胞对SW1990细胞的杀伤效应.结果 用氢化可的松处理7d后NK细胞量平均达到70.72% ~ 76.39%,与对照组的(72.61±3.76)%差异无统计学意义;10-6、10-5、10-4、10-3 μmol/L氢化可的松处理组NK细胞的增殖倍数分别为(9.13±0.94)、(9.67±1.51)、(10.33± 1.07)、(8.40±1.47)倍,均显著高于对照组的(4.23±0.82)倍(P值均<0.01);NK细胞对SW1990细胞的杀伤效率分别为(58.58±4.89)%、(62.27±5.63)%、(64.02±5.79)%、(63.88±3.61)%,均较对照组的(57.46±5.11)%增强,其中10-4μmol/L组的差异具有统计学意义(P <0.05);10-4、10-3μmol/L氢化可的松处理组NK细胞穿孔素表达分别为(96.71±3.04)%、(97.56±2.18)%,显著高于对照组的(92.40±3.53)%(P <0.05或0.01);10-5 μmol/L氢化可的松处理组NK细胞的颗粒酶B表达为(78.23±2.94)%,显著高于对照组(73.68±3.52)%(P<0.05);10-5、10-4、10-3 μmol/L氢化可的松处理组NK细胞IFN-γ表达分别为(96.61±2.04)%、(97.58±2.17)%、(98.00±1.77)%,均显著高于对照组的(92.44±2.74)%(P值均<0.01).结论 氢化可的松可促进IL-15活化的NK细胞增殖,适当浓度条件下增强对SW1990细胞杀伤活性,其机制可能与其穿孔素、颗粒酶B和IFN-γ表达上调有关。
氢化可的松对人NK细胞增殖及其对胰腺癌SW1990细胞杀伤效率的影响
【摘 要】
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目的 探讨氢化可的松对人外周血NK细胞增殖及其对胰腺癌SW1990细胞杀伤力的影响.方法 分离健康人外周血单个核细胞加入到含IL-15细胞因子的NK细胞培养基中诱导培养NK细胞.当NK细胞纯度达到70%以上时,加入10-6、10-5、10-4、10-3 μmol/L氢化可的松继续培养7d.以未加氢化可的松的NK细胞作为对照组.采用锥虫蓝染色计数细胞;采用流式细胞术检测CD3-CD56+ NK细胞含
【机 构】
:
221002江苏徐州,徐州医学院附属医院消化内科,南通大学附属建湖医院消化内科,解放军第97医院中心实验室,解放军第97医院中心实验室,解放军第97医院中心实验室,解放军第97医院中心实验室,2210
【出 处】
:
中华胰腺病杂志
【发表日期】
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2013年13期
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