【摘 要】
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目的优化细胞膜蛋白分离纯化技术,以期实现快速、高效分析细胞膜蛋白质。方法本文以乳腺细胞系MCF-10A为模型,用sulfo-NHS-LC-biotin标记完整的活细胞,使细胞表面蛋白生物素
【机 构】
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复旦大学生物医学研究院蛋白质组学和系统生物学研究所
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目的优化细胞膜蛋白分离纯化技术,以期实现快速、高效分析细胞膜蛋白质。方法本文以乳腺细胞系MCF-10A为模型,用sulfo-NHS-LC-biotin标记完整的活细胞,使细胞表面蛋白生物素化,细胞裂解后利用链亲和素对膜蛋白进行分离富集,再洗脱膜蛋白,达到分离纯化的目的。利用液相层析偶合串联质谱技术（liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS）鉴定提取得到MCF-10A膜蛋白。结果 sulfo-NHS-LC-biotin浓度为0.2 mg/
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