【摘 要】
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[目的]观察氟咯草酮(FLC)对共培养大鼠睾丸支持-生精细胞的影响,探究可能的机制。[方法]采用0.1%胶原酶和0.1%透明质酸酶两步酶消化法,分离得到原代睾丸支持细胞和生精细胞,
【机 构】
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复旦大学公共卫生学院教育部公共卫生安全重点实验室健康风险预警治理协同创新中心,
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[目的]观察氟咯草酮(FLC)对共培养大鼠睾丸支持-生精细胞的影响,探究可能的机制。[方法]采用0.1%胶原酶和0.1%透明质酸酶两步酶消化法,分离得到原代睾丸支持细胞和生精细胞,共培养24 h后,分别用0.01、0.10、1.00μmol/L的FLC染毒24 h。生精细胞脱落试验检测FLC对生精细胞脱落的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡率;实时荧光定量-聚合酶链反应检测凋亡通路关键信号分子和p38 MAPK的m RNA表达。[结果]FLC染毒可引起支持-生精细胞共培养体系中生精细胞脱落增加,在0.01、0.10和1.00μmol/L浓度组,生精细胞脱落百分比分别为(238.17±3.78)%,(265.89±9.51)%和(308.73±17.05)%。随着FLC浓度升高,早期凋亡率分别升高至(10.80±1.86)%,(13.52±0.72)%和(16.62±0.35)%;与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.001)。在0.10和1.00μmol/L浓度下,FLC染毒可明显上调凋亡线粒体通路中Bax、Cyt-c、Caspase-9和Caspase-3的m RNA表达(P<0.05或P<0.001),同时下调Bcl-2的m RNA表达(P<0.05);1.00μmol/L的FLC可引起Fas L与p38 MAPK的m RNA表达升高(P<0.05)。[结论]FLC染毒可影响大鼠睾丸支持-生精细胞共培养体系中凋亡通路相关信号分子的m RNA表达,p38 MAPK信号通路可能参与了FLC诱导的细胞凋亡。
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