【摘 要】
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将构建好的单链抗体2F3表达载体pTMF2F3ScFv转化到大肠杆菌BL21(DE3).先挑选出表达量高的单克隆,然后让其在37℃进行表达,并将表达时的培养条件进行优化.实验结果表明:最佳诱
【机 构】
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吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)，国家自然科学基金，吉林大学校科研和教改项目
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将构建好的单链抗体2F3表达载体pTMF2F3ScFv转化到大肠杆菌BL21(DE3).先挑选出表达量高的单克隆,然后让其在37℃进行表达,并将表达时的培养条件进行优化.实验结果表明:最佳诱导条件为开始诱导时的菌体密度OD590nm=1.0～1.8,所加异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)的浓度为0.3～0.5mmol/L,诱导时间7h,优化后目的蛋白表达量占菌体总蛋白的20%,并用发酵罐成功地进行了扩大培养,筛选了洗涤包涵体的最佳条件.采用两步法对包涵体复性进行了研究,用Western blotti
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