【摘 要】
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目的 观察吗啡预先给药对去甲肾上腺素(NE)诱导大鼠心肌细胞NF-κB活化的影响,探讨吗啡在细胞水平对缺血心肌的保护作用机制.方法 出生1～3 d的SD大鼠,分离、培养心肌细胞,将培
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目的 观察吗啡预先给药对去甲肾上腺素(NE)诱导大鼠心肌细胞NF-κB活化的影响,探讨吗啡在细胞水平对缺血心肌的保护作用机制.方法 出生1～3 d的SD大鼠,分离、培养心肌细胞,将培养4～5 d呈亚融合状态下的细胞随机分为5组(n=4):对照组(C组)、10-6 mol·L-1NE组(NE1组)、10-7 mol·L-1NE组(NE2组)、10-8mol·L-1NE组(NE3组)、10-5mol·L-1吗啡+10-8mol·L-1NE组(M+NE组).NE1组、NE2组、NE3组细胞培养基内分别加入相应浓度的NE,M+NE组在加入NE前30 min加入10-5mol·L-1吗啡.加入NE后24 h,进行下述指标的测定,采用流式细胞术测定心肌细胞胞浆NF-κB表达水平;采用免疫细胞化学染色技术测定NF-κB、TNF-α表达,采用酶免疫试验测定TNF-α含量,采用反转录PCR技术测定TNF-α mRNA表达.结果 与C组相比,NE1组、NE2组、NE3组细胞浆NF-κB水平降低,其中NE3组NF-κB表达水平最低,NE2组、NE3组TNF-α含量及TNF-αmRNA表达升高,NE3组NF-κB、TNF-α表达升高(P＜0.05);与NE3组比较,M+NE组细胞浆NF-κB水平升高,TNF-α含量及TNF-α mRNA表达降低(P＜0.05).结论 10-5mol·L-1吗啡预先给药可在一定程度上抑制NE诱导大鼠心肌细胞NF-κB的活化,从而减少了TNF-α的释放.
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