次级淋巴趋化因子SLC的克隆及其在原核系统中的表达

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：facekr

【摘要】

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以中国人的淋巴组织为材料抽提总RNA,用RT-PCR的方法扩增了次级淋巴组织趋化因子(Secondary lym-phoid-tissue chemokine,SLC)的成熟肽基因.序列分析表明,我们克隆的SLC基因

【作者】

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王东宁李明曾而良张惟杰吴祥甫

【机构】

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上海交通大学生命科学与技术学院,上海,200030中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所,上海,200031;解放军四五五医院;上海交通大学生命科学与技术学院,上海,200030;中国

【出处】

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生物工程学报

【发表日期】

：

2004年期

【关键词】

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次级淋巴组织趋化因子克隆表达趋化作用

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以中国人的淋巴组织为材料抽提总RNA,用RT-PCR的方法扩增了次级淋巴组织趋化因子(Secondary lym-phoid-tissue chemokine,SLC)的成熟肽基因.序列分析表明,我们克隆的SLC基因与文献报道的仅有一个核苷酸的差异,且并不影响氨基酸的编码.将SLC的cDNA插入含T7启动子的表达载体pET-28a(+)中构建重组质粒pET-SLC,转化大肠杆菌BL21(DE3)筛选表达菌株.表达菌株经1mmol/L IPTG诱导表达3～5h后,超声破菌,离心后将上清进行SDS-PAGE,可以看到在18kD左右处有明显的表达条带.用Ni2+亲和层析柱纯化表达产物,纯度达到90%以上.

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