脂肪干细胞分离培养鉴定及成软骨分化的实验研究

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目的对兔脂肪来源的干细胞(RADSCs)进行分离、培养和鉴定,并对转化生长因子β3(TGF-β3)促进RADSCs向软骨细胞分化进行初步探讨,为软骨组织工程中种子细胞的选择提供新思路。方法取成年大耳白兔脂肪组织获得细胞,进行原代和传代培养,观察细胞变化并绘制细胞生长曲线;用流式细胞术和免疫荧光技术鉴定细胞,将获取的第三代细胞进行体外成软骨细胞诱导,分别进行形态学观察和Ⅱ型胶原(ColⅡ)的免疫组化染色。结果所获取细胞呈类成纤维细胞样贴壁快速生长,传代后生长、增殖稳定,生长曲线呈典型的"S"型,细胞表面抗原CD34、CD45呈阴性反应,CD44、CD29呈阳性反应;在TGF-β3的诱导下,RADSCs成软骨细胞分化。结论成功分离得到了ADSCs,细胞体外增殖稳定快速,具有成软骨分化的潜能,含TGF-β3的诱导液有利于ADSCs向软骨细胞分化。ADSCs有望成为软骨组织工程中理想的种子细胞。
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